20、脊髓相关实验操作与共培养系统研究

脊髓相关实验操作与共培养系统研究

一、椎板切除术相关要点

椎板切除术在操作过程中可能会出现出血情况。若用力过猛牵拉骨头，或者椎板切除范围过于靠外侧，就容易引发出血。一旦出现出血，可使用无菌棉尖涂药器按压出血部位，或者使用明胶海绵来止血。

此外，椎板切除的范围应根据后续要进行的分析来调整：
|分析类型|椎板切除范围|
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|行为分析|通常仅切除一侧（半椎板切除术），涉及两个腰椎节段，这样能暴露大部分腰膨大区域，该区域是支配后爪的初级传入神经终止的地方|
|解剖分析|若所需移植细胞数量较少，切除一个节段的椎板就足够了|
|仅进行一次注射|无需进行椎板切除术，可通过相邻椎骨间的空隙进入并切开硬脑膜，暴露脊髓|

硬脑膜非常坚韧，即使是非常锋利的微量移液器尖端也无法穿透，因此必须切开硬脑膜。切开硬脑膜后，脑脊液会立即流出。若没有脑脊液漏出，则说明硬脑膜切开不充分。

在装载细胞时，由于细胞会随时间沉淀到管底，所以在装载前要轻轻敲击试管（或上下吸打两到三次）使细胞重新悬浮。并且，在椎板切除术完成且准备好注射之前，不要将细胞装入微量移液器，否则细胞会堵塞移液器。同时，建议每次只装载足够进行一到两次注射的细胞量。

二、背脊髓共培养系统研究背景与意义

研究脊髓突触的形成、维持和可塑性，对于理解生物过程的细胞机制以及疾病状态至关重要。然而，在体内研究脊髓突触发生的生物病理机制存在技术挑战，因为脊髓等高密度组织或器官的体内环境复杂，包含不同类型的细胞、结缔组织和结构成分。

为克服这一障碍，研究人员优化了背根神经节（DRG）神经元和背脊髓（DSC