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文献分享：基于CRISPR/Cas9改造人类自然杀伤细胞：转染敲除方案和解读方案用以评估其影响CRISPR/Cas9-Based Gene Engineering of Human Natural Killer Cells: Protocols for Knockoutand Readouts to Evaluate Their Efficacy研究背景自然杀伤细胞（natural killer cell，NK细胞）细胞在人体的先天免疫系统中起着重要的作用，能对各种病原...

推荐阅读：人皮肤成纤维细胞_Optimized_Protocol_298基因治疗方式可分为间接体内法（exvivo）和直接体内法（invivo）。离体基因治疗方法亦称间接法是将患者的某种组织或细胞取出体外，在短期培养的条件下转入目的基因，进行筛选和富集整合有外源基因的阳性细胞，然后再回输到患者体内。该方法具有靶细胞明确，转染效率高的优点，因此在基因治疗中被较多采用。目前，国际上已有"# 余种疾病的基因治疗研究采用皮肤成纤维细胞为靶细胞，并且越来越多的研究已进入临床"期试验。..

【细胞1】培养条件：RPMI1640(改良型)(CellCookcat:CM2006) 10%胎牛血清 针对该细胞我们可以提供完全培养基，该培养基是针对该细胞长期测试而来，可保持细胞最佳生长状态，建议随细胞进行购买。传代方法：1:3传代。维持细胞密度在1*10^4-1*10^6cells/ml。倍增时间：48 hours (PubMed=25315077);~50-70 hours (DSMZ)冻存液配方：完全培养基+5%DMSO难度等级：++ 培养要点：需控制细胞密度特征特

1.Nature发布PSCK9碱基编辑疗法最新数据：一次注射PCSK9降低约90％，持续长达10个月据6月26日报道，首个人体基因编辑临床试验数据刊登在新英格兰医学杂志上，效果突出、副作用良好，全球医药界兴奋不已，正在开启一针治愈遗传病的新时代。0.3mg/kg剂量组的3名病人，注射28天后，血浆ATTR蛋白平均下降87%，这个结果已经优于目前终身药物治疗的效果（约80%），而且正在试验1mg/kg剂量组，效果有望进一步提升。另外，人体起效剂量大约只有猴子试验剂量的十分之一。临床前基因测序的结果显示

NIH3T3（小鼠胚胎成纤维细胞）规格：1×10^6/瓶 或1ml冻存管细胞来源：ATCC培养条件：DMEM(H)+10%NCS (货号：HN-FBS-500)细胞特性：贴壁（成纤维细胞样）温度：37℃气相：95%空气，5%二氧化碳运输方式；复苏细胞常温运输/冻存细胞干冰运输 NIH3T3（小鼠胚胎成纤维细胞）传代：1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培

Mol Cancer丨lncRNA ANRIL通过维持ATR蛋白稳定性来促进同源重组介导的DNA修复从而增强抗癌性IF：27.4042021年7月5日异常增强的DNA损伤修复导致了多种癌症的治疗耐药性。近年来，长链非编码RNAs (lncRNAs) 已被证明是DNA损伤修复不可或缺的参与者，并为克服癌症耐药性提供了新的靶点。然而，大多数lncRNAs在DNA损伤修复中的确切作用在很大程度上仍然未知。本研究鉴定了一个重要的ATR相互作用lncRNA ANRIL，并揭示了其在HR介导的DNA损伤修复

01Metabolites︱研究玉米棒对干旱胁迫响应的代谢组学方法由一路向北编译来自纽约大学的Isabella Gaffney和Jonathan Brett Sallach于2021年7月3日在《Metabolites》上发表了题为《Metabolomic Approaches to Studying the Response to Drought Stress in Corn (Zea mays) Cobs》的文章，玉米是全球最重要的粮食作物之一，对不同的生长环境具有很强的适应性。然而，干

每个人从出生开始，都注定面临着老去的一天。科学技术的发展或许能够缓解衰老的速度。但针对具体的方法还是要仔细甄别。例如近年来比较流行的“干细胞疗法”预防衰老的研究项目，实际效果可能并不如其宣传的那么有效。那么，科学技术的进步究竟是否能够缓解衰老的进程呢？我们应该做些什么减缓衰老的步伐呢？针对这些问题，小编整理了最近一段时间有关衰老的研究进展，希望能够为读者朋友们带来启发。1.Science：抑制肾型谷氨酰胺酶依赖性的谷氨酰胺分解可以消除衰老细胞doi:10.1126/science.abb5916

细胞凋亡机制对比：癌细胞、植物细胞、程序性和非程序性

1.显微镜下的癌细胞分裂：https://www.bilibili.com/video/BV1kZ4y1w7ue?share_source=copy_web2.白细胞吞噬细菌（吞噬作用）：https://www.bilibili.com/video/BV17f4y1t7L1?share_source=copy_web3.骨髓间充质干细胞有丝分裂：https://www.bilibili.com/video/BV1Uz4y117Yw?share_source=copy_web4.显微镜下的神经元：

Lonza提供的原代细胞和培养基产品支持了许多研 究领域的开发。因其杰出的科学支持团队和30多 年来始终如一、高性能的产品而得到广泛认可。Lonza原代细胞： -易于使用 -每类细胞都可以提供大量，多批次细胞，供客户 长期研究 -每批次细胞均完成全面的质量控制测试 -每种细胞可以提供推荐的培养基和试剂以保证细 胞的性能 -所有的人体细胞产品使用的所有组织都获得了书 面的，合法的研究用途许可Lonza可以为所有正常细胞和病变细胞提供详细的 供体信息，包括病史。#：原代细胞产品因其特殊性，所有.

鄙人做成骨细胞培养检测相关指标，走了许多弯路，今将自己的总结的经验贴出，望后续战友做成骨细胞培养时少走弯路，加快实验进程，不要把过多的时间耗费在培养上！1.成骨细胞的取材：选取新生SD大鼠的乳鼠（有参考书上新生24h的，鄙人试过72h的乳鼠，消化下来的成骨细胞活力也是很不错的），具体取材方法不详述。2.将去除血管及结缔组织的骨片放置在1mlPBS液体中（PBS不要放太多，否则延长剪碎时间），用剪刀剪成1*1mm的组织快，越小越好（越小越能消化完全），一只乳鼠的头盖骨加胰酶2ml，37℃水浴中消化30m

推荐阅读：上皮细胞培养方法及优化解决方案LonzaUltraCULTURE 无血清培养基使用说明lonza原代细胞、培养基目录方法一：步骤如下：取体质量60 - 70g雄性SD 大鼠无菌条件下取出大脑,放入预冷DHank′s 中,剥离软脑膜、大血管及大脑髓质,收集大脑皮质, 剪碎成1mm3 的小块,移入匀浆器中匀浆, 将匀浆液依次通过80 目和200 目尼龙网过滤,收集200 目尼龙网上的微血管段。用0.12 %胶原酶37 ℃消化20min。冲洗液冲洗2.

剂型技术的完善和创新可推动膳食补充剂的性能，比如双胶囊和微粒。传统上，在提高补充剂性能时，关键原料的生物利用度、稳定性以及定时性和有针对性的释放是企业面临的主要挑战。为了应对这些挑战，Lonza正在研究一种剂型技术，这种技术既可以用于硬胶囊，也可以用于充液胶囊。一个典型的例子是使用微粒，由微粒制成的硬胶囊可以定时释放这些成分，因此，这些成分可以在一天之内送到人体。除胶囊外，微粒还可以用于即食混合物和功能性食品。微粒能促进典型的不相容成分的结合，这反过来有助于增加胶囊所能提供的营养价值。同...

近年来，随着生物医药技术的快速发展，细胞培养技术广泛应用于免疫学、商业应用和生物制品等多个领域。细胞培养技术可用于分离、增殖和鉴定病毒，也适用于筛选抗癌药物和对有毒物质进行检测等方面的研究。可以利用细胞培养技术进行大规模生物制品研发，如单克隆抗体、疫苗及重组蛋白的制备、药物开发、干细胞移植、人造器官培养等。因此，细胞培养技术已成为科学研究和医药制品开发的关键因素之一。细胞培养技术中使用的培养基主要包括合成细胞培养基和天然细胞培养基，其中应用广泛的是天然培养基。血清是一种在体外培养细胞时加入的物质，它

经过了近十多年既漫长又短暂的发展，iPS细胞技术已经取得了举世瞩目的进展。一个个突破性的成果既给我们带来了喜悦，也带来了新的挑战，细胞重编程有望迎来一个新的研究浪潮。尽管iPS细胞有着诱人的应用前景，然而，未来iPS细胞的研究也面临着许多亟需解决的问题：第一，效率问题。目前，诱导产生iPS细胞的率仍然很低，这与基因导人的方式整合位点、表观遗传学等多种因素有关。这已成为制约iPS从实验室走向临床的最大瓶颈。因此，如何提高iPS细胞的制备效率仍是人们普遍关注的问题。第二，安全性问题。现在诱导iPS细胞通常借助逆

日本顺天堂大学研究生院医学研究科血液内科学的安藤美树副教授、安藤纯特任副教授和小松则夫教授、妇产科学讲座的增田彩子助教和寺尾泰久教授，以及TOKIWA-Bio公司的董事中西真人、东京大学医科学研究所干细胞治疗部门的特聘教授中内启光等人组成的联合研究团队，利用比原来更加安全的方法，成功培养了能抑制宫颈癌繁殖的iPS细胞源人乳头瘤病毒（HPV）抗原特异性杀伤T细胞。与源自外周血的杀伤T细胞相比，该iPS细胞源杀伤T细胞能在人体内强力抑制宫颈癌繁殖，研究团队利用小鼠确认到可以延长生存期。这项成果能实现抑制宫颈

hi~大家好！我是三三，又到新一期和大家漫谈科研的时候啦！2020年12月15日，星期二，生科的小伙伴们，你们还好吗？进入2020年的最后一个月，总结\计划\恍惚？也许接踵而来！但是，既然身子已许给了生科这条狗，那么还请君且行且加油，努力充实自己才是王道！（敲黑板）话不多说，开始我们今天充电10min！还记吗？曾经的曾经，我们为了记住那些该死的培养基种类，天天嘚嘚着“厌、养、选、基、鉴”？然鹅，直到现在，培养基的发展可谓是迅猛，各种不同类型的培养基层出不群，再也不是几句顺口溜可以解决的.

hi~大家好！我是三三，又到了和大家漫谈科研的时候了！2020年12月8日，星期二，科研路上我们即将又度过一个春秋！进入2020年的最后一个月，总结\计划\恍惚也许接踵而来！但是，既然走上了科研这条路，那么请君且行且加油，努力充实自己吧！话不多说，开始我们今天的正题。还记吗？曾经的曾经，我们为了记住那些该死的培养基种类，我们天天重复着“厌、养、选、基、鉴”？但是直到现在培养基的发展可谓是迅猛了，各种不同类型的培养基层出不群，再也不是几句顺口溜可以解决的了！本着知其然，也要知.

无血清培养基是在合成培养基的基础上发展起来的，与传统的培养基相比，既能满足细胞在体外长时间培养的要求，又能避免动物血清所带来的不利因素。无血清培养基的发展历程分为无血清培养基（Serum-Free Medium，SFM）、无动物源培养基（Animal Component Free Medium，ACFM）、无蛋白培养基（Protein-Free Medium，PFM）及化学成分限定培养基（Chemically Defined Medium，CDM）等四类。在使用无血清培养基时，有些细胞需要逐渐适应，

CAR-T(Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy)，即嵌合抗原受体T细胞免疫疗法。该疗法是一种出现了很多年但近几年才被改良使用到临床中的新型细胞疗法。在急性白血病和非霍奇金淋巴瘤的治疗上有着显着的疗效，被认为是最有前景的肿瘤治疗方式之一。正如所有的技术一样，CAR-T技术也经历一个漫长的演化过程，正是在这一系列的演化过程中，CAR-T技术逐渐走向成熟。这种新的治疗策略的关键之处在于识别靶细胞的被称作嵌合抗原受体（chimeric antigen r

更多人原代细胞，请微信搜索“泽平科技”进行咨询！外周血单个核细胞（PeripheralBloodMononuclearCells，PBMC）是外周血中具有单个核的细胞的混合群体，是免疫细胞的丰富来源，可以进一步纯化分离出多个细胞类型，如天然杀伤细胞（naturalkillercell，NK）、T淋巴细胞、B淋巴细胞。此外，其中的单核细胞（monocyte）与各种细胞因子一起培养，可定向分化为巨噬细胞或树突状细胞等。外周血单个核细胞常用于免疫原性测定、细胞标志物研究、细胞治疗研究等。...

研究表明，2019-nCoV等冠状病毒靶细胞主要为上皮细胞，可引发急性细胞感染，如SARS、MERS虽然存在细微差异，但临床致病过程相似，SARS-CoV主要感染有纤毛的支气管上皮细胞和人肺II型上皮细胞，MERS-CoV主要感染无纤毛的支气管上皮细胞和人肺II型上皮细胞。正常人支气管上皮细胞BEGM中培养的支气管上皮细胞LONZA原代支气管/气管上皮细胞北京泽平代理的美国进口LONZA人支气管/气管上皮细胞，为捐献者肺分叉上方的气道上皮分离得来，每支包含≥500,000个细胞.

人原代肺气管/支气管上皮细胞始于2019年末的新冠肺炎(COVID-19)疫情爆发，已经进入全球大流行状态。截止2020年4月21日，全球已有超过200个国家，240万人感染新型冠状病毒(数据来源：丁香园)。面对这一挑战，各国均在加速COVID-19新冠病毒疫苗的研发(全球已有超过100个COVID-19候选疫苗正在研发)，其中由陈薇院士牵头研发的重组新冠病毒疫苗正式进入II期临床试验阶段，但疫苗的安全性，有效性依然需要较长时间的验证。因此目前最快的方法依旧是“老药新用”，将现有已知的安全药物重新用作抗

我们在科研路上都会遇到一些需要帮助的时刻，想和同路人聊聊，有问题想交流，有心事想诉说……小编新建了十余个交流群，其中包含不同的研究方向，不同的实验方向，以及各种综合类型的大群。希望大家都能敞开心扉。互帮互助。① SCI 论文写作交流群② 免疫+肿瘤+药学交流总群③ 基础研究交流总群④ 生物信息交流总群⑤ 基因编辑交流总群⑥ 基本实验技术交流总群⑦ 临床医学交流总群⑧ 科研综合交流群⑨ 丁香通试用+采购群⑩ WB 学习交流群⑪ PCR 学习交流群⑫ 流式

内容转自“泽平科技”微信公众号，技术咨询请微信搜索“泽平科技”土壤中的微生物资源非常丰富，原核生物细胞含量大约1×10^7个／g，但用传统技术培养的微生物仅占微生物总数的0.01％~10％，且大部分微生物处于不可培养的状态，使相当多的菌种不能被充分地开发和利用。由于土壤微生物成分复杂，常规提取总DNA的方法难以去除腐殖酸，而微量的腐殖酸便可抑制PCR扩增中的TaqDNA聚合酶以及酶切反应的限制性内切酶活性。另外，土壤质地和成分的差异也会影响土壤微生物DNA的提取效果．土壤DNA提取的一般方法

ELISPOT酶联免疫斑点技术酶联免疫斑点技术（Enzyme Linked Immunospot Assay，简称ELISPOT）是细胞免疫学研究中更敏感的检测方法，可以在单细胞水平对抗体分泌细胞(ASC)及细胞因子(CK)分泌细胞进行检测，比ELISA和有限稀释法等具有更髙的灵敏性，能从20万-30万细胞中检岀1个分泌该蛋白的细胞。并且该方法能够对抗原刺激后的活细胞进行功能性检测，具有较髙的特异性、直观可信度髙，并且易操作，已被广泛用于分泌CK细胞检测或ASC测定中，在国内外免疫学界获得了广泛的...

内容转自“泽平科技”微信公众号，技术咨询请微信搜索“泽平科技”胚胎干细胞，是一种具有具有持久或终身具有更新能力的细胞，它能够或发育成几乎所有人类的各种组织或器官，故其在医学上具有非常重要的研究价值与应用前景。 人胚胎干细胞是在人胚胎发育早期——囊胚（受精后约5—7天）中未分化的细胞。囊胚含有约140个细胞，外表是一层扁平细胞，称滋养层，可发育成胚胎的支持组织如胎盘等。中心的腔称囊胚腔，腔内一侧的细胞群，称内细胞群，这些未分化的细胞可进一步分裂、分化，发育成个体。内细胞群在形成内、中、外三个胚层时开始分化

内容转自“泽平科技”微信公众号，技术咨询请微信搜索“泽平科技”近年来，世界各国逐渐升高的肥胖率，常导致非酒精性脂肪肝（Non-alcoholic Fatty Liver Disease, NAFLD）、糖尿病等疾病，成为公共健康的一个严重威胁。优质的模型饲料，是动物模型研究肥胖症及其相关疾病发病机制、评估治疗成效的重要保障。模型饲料是指在实验动物中用于建立营养学异常模型的饲料，主要用于模拟在人类膳食或动物饲料中营养素含量不足、过载、营养素之间比例失衡，观察其导致的生理或病理生理改变，以研究其机制，并

内容转自“泽平科技”微信公众号，技术咨询请微信搜索“泽平科技”间充质干细胞（mesenchymal stem cells，简称MSC）是能分化为多种细胞类型的多能性细胞，可分化为软骨细胞、成骨细胞、肌细胞、脂肪细胞等。由于干细胞在再生医学中，可以改善遗传、神经疾病患者的生活，因此其研究获得了很好的发展。骨髓（bone marrow，简称BM）是间充质干细胞的主要来源，但是从患者身上收集骨髓是一种痛苦且侵入性的过程。 因此，研究人员需要找出从其他组织、通过非侵入性方式获取间充质干细胞的方法。目前为止，