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前言转染是将目的DNA、RNA或蛋白转入到细胞中以评估他们在细胞水平的功能，影响基因或是表型的能力。这使得我们可以研究新的基因和评估他们对细胞内源基因的表达或其他细胞功能的影响。有时候，我们也会直接转入蛋白质以达到更快的细胞调控或是一些特别的应用（如CRISPR依赖的基因组编辑）。转染的应用非常广泛，不仅仅是基础研究，临床应用如基因药物、免疫疗法和iPS介导的再生医学也必不可少。重组蛋白技术不仅被广泛用于生物药的生产，而且它也促进了大量的功能、遗传作图和生物化学研究。转染可以作用于不同的细胞（如

编辑推荐：人肝脏细胞_Optimized_Protocol_364　　正常的原代细胞比肿瘤细胞更能代表体内细胞的功能。利用原代细胞研究相关通路的分子机制是更加可靠的。尽管大多数增殖的、肿瘤来源的细胞系可以通过标准的转染方法(如脂质体转染或聚乙烯亚胺[PEI])轻松转染，但转染原代细胞仍然是一个巨大的挑战。原代人肝细胞(PHH)是临床前药物开发中确定药物代谢、转运和毒性的“金标准”体外模型。（北京泽平lonza代理，微信搜索泽平科技进入咨询）然而，正如非分裂原代细胞都难以转染一样，使用者面...

推荐阅读：人iPS细胞_Human_Induced_Pluripotent_Stem_Cells_using_Nucleofector_Technology.实验方法原理 1. 研究表明，各种蛋白质都可以通过短肽结合的方式进入细胞，这种短肽可以介导蛋白质的转导。 2. 各种亲溶剂化和再折叠技术处理包涵体蛋白表达在大肠杆菌中有生物活性蛋白发展到允许容易和大规模化生产治疗性蛋白。 实验材料 鼠成纤维细胞 试剂、试剂盒

推荐阅读：人胚胎干细胞_Optimized_Protocol_310外源基因进入细胞主要有三种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法，实际上其基本原理都是利用不同的方法在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入，但是由于前两者的效率低且伤害较大，所以现在除了对于一些特殊细胞系，一般的转染方法都利用脂质体。利用脂质体转染和其他方法一样，最重要的就是防治其毒性，因此脂质体与治理的比例，细胞密度以及转染的时间长短和培养基中血清的含量都是影响转染效率的重要问题，通过实验摸索的合适转染条件对于效率的提.

推荐阅读：人皮肤成纤维细胞_Optimized_Protocol_298基因治疗方式可分为间接体内法（exvivo）和直接体内法（invivo）。离体基因治疗方法亦称间接法是将患者的某种组织或细胞取出体外，在短期培养的条件下转入目的基因，进行筛选和富集整合有外源基因的阳性细胞，然后再回输到患者体内。该方法具有靶细胞明确，转染效率高的优点，因此在基因治疗中被较多采用。目前，国际上已有"# 余种疾病的基因治疗研究采用皮肤成纤维细胞为靶细胞，并且越来越多的研究已进入临床"期试验。..

推荐阅读：人原代肝脏细胞_Optimized_Protocol_364正常的原代细胞比肿瘤细胞更能代表体内细胞的功能。利用原代细胞研究相关通路的分子机制是更加可靠的。尽管大多数增殖的、肿瘤来源的细胞系可以通过标准的转染方法(如脂质体转染或聚乙烯亚胺[PEI])轻松转染，但转染原代细胞仍然是一个巨大的挑战。原代人肝细胞(PHH)是临床前药物开发中确定药物代谢、转运和毒性的“金标准”体外模型。（北京泽平lonza代理，微信搜索泽平科技进入咨询）然而，正如非分裂原代细胞都难以转染一样，使用者面临在保持肝细

推荐阅读：小鼠胚胎成纤维细胞-非永生化细胞_Optimized_Protocol_335实验方法原理 将小鼠的胚胎成纤维细胞（MEF）从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置MEF生长培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。 实验材料 孕鼠 试剂、试剂盒 PBSEDTA胰酶MEF生长培养基FBS高糖DMEM 仪器、耗材 眼科直剪眼科直镊眼科弯镊玻璃平皿3尼龙滤网离心...

推荐阅读：小鼠脾脏T细胞_Optimized_Protocol_301细胞转染主要分三个步骤：细胞制备、细胞体外刺激、细胞感染。01细胞制备小鼠脾脏细胞悬液制备1. 脱颈处死小鼠，腹部朝上正体位暴露小鼠右侧腹部。2. 75％ 乙醇消毒，剪开腹部切取脾脏。3. 将脾脏放入预先放置好 cell strainer（FALCON，352350）并已加入 5 ml 无菌 PBS 的六孔板或培养皿中。4. 用无菌注射器柄充分研磨脾脏。5. 弃掉 cell strainer，轻柔吹打细

推荐阅读：小鼠胚胎成纤维细胞小鼠胚胎成纤维细胞1.产品名称：小鼠胚胎成纤维细胞2.组织来源：胚胎组织3.产品规格：5×10^5cells/T25细胞培养瓶4.细胞简介：小鼠胚胎成纤维细胞分离自胚胎；成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，.

推荐阅读：人胚胎干细胞H9_Optimized_Protocol_310国际上比较认可的转染方法：核酸转染仪是将传统的电穿孔技术和专用的转染试剂结合起来的产物，针对不同的细胞类型，采用一套最理想的转染试剂和转染程序，以达到最理想的转染效率。核酸转染仪特别适用于转染原代细胞和难以转染的细胞系，如T细胞及PC-12细胞系等。它可以直接将DNA转染到细胞核内，由此实现了因受到细胞分裂限制而一直困扰人们的原代细胞的高效率转染。目前通过核酸转染仪，可以在肿瘤研究、免疫学、组织工程学及心血管疾病研究领域中轻而易举.