DNA Pull-down

DNA Pull-down技术是体外研究DNA与蛋白互作的有力工具。

背景说明

针对目标区域体外制备脱硫生物素标记的特异性DNA探针，使其与待测蛋白液孵育，可与偶联在磁珠上的链霉亲和素结合，形成“生物素化DNA-蛋白质”复合物。生物素与链霉亲和素间的作用是目前已知强度最高的非共价作用，采用链霉亲和素磁珠将靶DNA及其结合蛋白从待测蛋白液中分离出来，洗涤后，将非特异性结合蛋白去除，最后，经洗脱液洗脱，得到目的DNA探针-蛋白质复合物，通过western blot检测洗脱液中是否有待测蛋白；通过LC-MS/MS技术检测靶DNA的潜在结合蛋白并鉴定蛋白质类型。

图 DNA Pull-down流程图

服务流程

客户在线下单——订单/实验材料确认——样品处理——探针标记——蛋白与探针共孵育——Western blot或LC-MS/MS检测——结果交付

服务内容及说明

适用范围

1、验证已知DNA与蛋白的相互作用；

2、筛选与已知DNA相互作用的未知蛋白。

DNA Pull-down的优点

1、可富集分析低丰度蛋白；

2、探针制备简便，周期短；

3、获得特异性蛋白与下游蛋白质检测技术兼容。

DNA Pull-down的缺点

1、长链探针往往存在非特异结合现象；

2、反应条件要求无核酸酶；

3、体外实验，相对体内实验存在一定弊端。

客户下单及项目信息填写

在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录，请客户按照页面提示填写项目名称、选择项目类型、填写个人信息及联系方式，提交项目所需要的具体信息，包括：

1、组织、细胞等样品类型及目的基因种属、ID号与序列等相关信息；

2、样本数量、检测方法（可选WB或MS）；

3、尽可能丰富的相关资料、文献。

实验信息

实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户，并发送实验报告查看网址。实验结题后，实验报告、检测结果可在线查看或打印，并永久保留。

实验周期

致电详询

实验交付与标准 

1、所有实验的原始数据（包括实验过程、实验试剂与设备等）；

2、详细实验报告及结果分析（可选Western blot或MS结果）；

3、构建含目的基因的质粒、菌液，测序报告。