20、脱细胞组织的制备、特性及应用

脱细胞组织的制备、特性及应用

1. 脱细胞方法

脱细胞过程通常包括细胞破坏和细胞碎片清洗两个步骤。常见的脱细胞方法可分为化学方法和物理方法。化学方法能实现完美脱细胞，但会对细胞外基质（ECM）造成严重损伤；物理方法脱细胞效果相对较弱，但对 ECM 的损伤较小。由于组织类型多样，如基于细胞的组织、高细胞密度和基于 ECM 的组织、高 ECM 密度组织，且大小、厚度和体积各异，因此需要根据具体组织和使用目的选择合适的脱细胞方法。

1.1 化学脱细胞方法

化学脱细胞方法因其操作简便而成为主要方法。具体操作是将组织浸入表面活性剂溶液、高渗和低渗溶液以及酒精等溶液中，然后进行清洗以去除细胞碎片和表面活性剂。通常以脱细胞组织中残留 DNA 量达到 200 µg/mg 组织作为脱细胞标准。

常用的表面活性剂有十二烷基硫酸钠（SDS）、脱氧胆酸钠（SDC）和 Triton X - 100 等：
- SDS ：是最常用的洗涤剂，能有效脱细胞，但会严重损伤脱细胞的细胞外基质（dECM）。由于其具有细胞毒性，处理后的组织需要充分清洗。在考虑脱细胞组织的结构对细胞功能（如细胞形状、生长和分化）以及组织再生的影响时，需谨慎制定脱细胞方案。
- SDC 和 Triton X - 100 ：常用于脱细胞，表面活性剂活性较低，脱细胞作用相对温和，细胞毒性低于 SDS。
- 表面活性剂组合 ：可有效脱细胞，例如先用 SDS 处理组织，再用 Triton X - 100 处理以去除残留的 SDS。

1.2 物理脱细胞方法