药物亲和反应的靶点稳定性（DARTS）实验

DARTS实验是一种通过利用蛋白酶（如胰蛋白酶）对蛋白质水解的敏感性，来鉴定小分子药物与靶蛋白相互作用的技术：当小分子药物与特定靶蛋白结合后，会使该蛋白对蛋白酶的降解产生抗性，通过比较药物处理组与对照组的水解产物，即可识别出被稳定的靶蛋白。

背景说明

在生理条件下，蛋白质处于动态平衡状态，具有多种替代构象，还可能表现出一定程度的局部可逆展开。当特定配体（如药物）结合时，由于蛋白质和药物配体之间形成的疏水、氢键或静电相互作用导致自由能变化，平衡将转向高度有利于配体结合的构象，这导致了热力学上更稳定的状态。在这种状态下，目标蛋白的构象变化显著减少，对变性和蛋白酶水解的抵抗力显著增强。

DARTS的基本原理是小分子配体与靶蛋白结合后可以稳定靶蛋白，增强其对蛋白水解酶水解作用的抗性，如图所示。蛋白与小分子药物结合后，对亲和反应后的混合蛋白进行酶水解，酶解产物经凝胶电泳分离后，与空白组比较，与药物结合的蛋白片段增多，如图所示。

图1 DARTS技术原理。

服务流程

客户在线下单——细胞培养——药物浓度摸索——正式实验，药物处理——蛋白酶水解处理——细胞裂解及蛋白提取——WB检测或质谱鉴定——图片及数据分析

服务内容及说明

适用范围

1、直接药物靶点鉴定；

2、高通量药物筛选；

3、天然产物靶点发现。

客户下单及项目信息填写

在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录，请客户按照页面提示填写：

1、项目名称、选择项目类型、填写个人信息及联系方式进行预提交；

2、提交项目所需要的具体信息：细胞样本、目标蛋白及对应的一抗等。

实验信息

实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户，并发送实验报告查看网址。实验结题后，实验报告，检测结果可在线查看或打印，并永久保留。

实验周期

致电详询。 

实验交付内容

1、蛋白的WB条带图；

2、完整的实验数据及实验报告。

案例展示

图2 DARTS的SDS-PAGE检测结果。

参考文献

Kuang B, Geng N, Yi M, et al. Panaxatriol exerts anti-senescence effects and alleviates osteoarthritis and cartilage repair fibrosis by targeting UFL1.J Adv Res. 2025;74:493-511.2.