【测评】抗原乳化方法学评测：去离子水乳化、机械乳化法、PBS 缓冲液乳化..

佐剂（adjuvant）是指预先或与抗原同时注入体内，能够增强机体对该抗原免疫应答的非特异性免疫增强性物质。目前最常用于动物实验的佐剂是弗氏完全佐剂（complete Freund's adjuvant, CFA）和弗氏不完全佐剂（incomplete Freund's adjuvant, IFA）。在进行人工免疫诱导实验中，常将佐剂与抗原溶液按比例混合进行乳化，以增强抗原诱导机体发生的免疫反应，获得高效价抗体。

佐剂的作用机制主要为：

（1）改变抗原物理性状，延缓抗原降解，延长抗原在体内潴留时间。

（2）刺激抗原提呈细胞，增强其对抗原的加工和提呈。

（3）刺激淋巴细胞的增殖分化，增强和扩大免疫应答效应。

作为疫苗制备的关键环节，抗原乳化是将佐剂与抗原溶液按比例混合，制备成 “油包水”乳剂的过程， 其作用机制是在有油和水的混合物中加入乳化剂（本实验为羊毛脂）后，进行机械混合，

一方面，乳化剂的亲水基结合水，亲油基结合油，使油-水两相之间形成一层致密的介面膜，降低了油与水之间的接口张力形成小液滴，同时对液滴起保护作用；

另一方面，由于乳化过程中吸附和摩擦等作用使得液滴表面带电，带电液滴在接口的两侧会形成双电层结构，其排斥作用使得小液滴难以聚集，从而提高了乳化液的稳定性。理想的乳化能增强机体的免疫应答，提高免疫抗原的保护效果。

因此，乳化过程十分重要，而佐剂、抗原溶剂、时间、温度、乳化器及操作技巧等每个环节的变化，都会影响乳化效果。

目前已有报道，去离子水和 PBS 缓冲液都可以作为抗原乳化的溶剂，且在乳化过程中不改变抗原的结构和免疫原性。 本实验结果显示，以去离子水为溶剂进行 GPI 多肽抗原和 CFA 乳化，是一个缓慢而温和的过程，乳化时间相对较长，便于人工控制，但冰浴乳化操作较繁琐。以 PBS 缓冲液为溶剂进行乳化，则是一个快速的过程，乳化完成时间较短（2～5 min），容易乳化过度，难以人工控制。这可能是由于 PBS 缓冲液中的磷酸根基团之间的静电斥力作用，增强了乳化液的稳