AbMole科研-一种监测中枢神经系统脱髓鞘后恢复的新工具可以消除促进脱髓鞘策略的风险

在多发性硬化症中，虽然在炎症成分方面取得了显著进展，但脱髓鞘病变的修复仍然是一个未满足的需求。

尽管在实验模型中产生了好的结果，但在后续的试验中，一些有利于或促进髓鞘再生的候选化合物尚未达到预期的结果。这些失败的一个可能的原因是，在大多数情况下，试验中疗效仅评估组织学，没有评估功能恢复。

我们建立了非洲爪蟾条件脱髓鞘转基因模型Tg（mbp:GFP-NTR），其候选分子可以加速自发性脱髓鞘形成。非洲爪蟾是体内研究髓鞘形成的经典模型，因为蝌蚪是半透明的。我们推断脱髓鞘应转化为感觉运动功能的丧失，随后在脱髓鞘后行为恢复。

为此，我们测量了脱髓鞘之前和之后以及正在进行的自发再生过程中的游泳速度和距离，并开发了基于视觉避免虚拟碰撞的功能分析。在这里，我们表明这些功能和临床表现的改变与脱髓鞘水平密切相关，并且通过计算视神经中髓鞘少突胶质细胞的体内数量来检测组织学上的再脱髓鞘，转化为功能恢复。

该方法在使用促髓鞘再生剂（clemastine, siponimod）治疗的蝌蚪中得到进一步验证，结果显示视神经髓鞘再生增加与功能改善相关。我们的数据表明，在简单的条件脱髓鞘体内模型中，将组织病理学参数和功能参数相关联以筛选促进脱髓鞘再生的分子具有潜在能力。

AbMole（https://www.abmole.cn/）精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：一种新的监测中枢神经系统脱髓鞘后恢复的工具可以消除促进脱髓鞘策略的风险。

Siponimod（Abmole，M2428，纯度>99%）https://www.abmole.cn/products/baf312.html 
辛波莫德是一种二代S1P受体调节剂，选择性作用于S1P1和S1P5受体，EC50分别为0.39 nM和0.98 nM，比作用于S1P2， S1P3和S1P4受体选择性高1000倍以上。

在分别显示了视觉回避指数的失败和恢复与给定的脱髓鞘病变或视神经自发髓鞘恢复之间的直接联系之后，我们猜测这种功能测试是否也适用于评估药物诱导的髓鞘再生加速。我们之前已经表明，在一组有利于髓鞘再生的候选药物中，clemastine和siponimod是我们的条件脱髓鞘蝌蚪模型中加速髓鞘再生最有效的药物。

研究表明，在小鼠新生幼崽缺氧损伤中，clemastine通过对OPC上M1毒碱受体的影响，促进OPC分化和髓鞘形成。siponimod是一种强效和高选择性的鞘鞘苷1-磷酸受体1和5（S1P1/5）调节剂，已被证明通过对先天免疫系统和少突胶质细胞成熟的双重作用，促进髓鞘再生。

在最后一系列实验中，在条件脱髓鞘前、MTZ诱导脱髓鞘结束时，以及自发或clemastine或siponimod驱动恢复3天后，计算每个视神经中GFP+少突胶质细胞的数量（图5A）。在R3时，clemastine（200 nM）处理的蝌蚪每个视神经中GFP+细胞的数量高出1.5倍（13.5±0.3）与对照动物（8.8±0.4）。正如预期的那样，这种clemastin驱动的髓鞘再生增加转化为所有三种行为测试的功能改善，行走距离比对照组增加了1.58倍（71.2±6.7 cm比45.0±5.8 cm），速度增加了1.58倍（2.05±0.19 cm/s比1.3±0.17 cm/s），视觉回避指数比对照组增加了1.4倍（76.6%±4.6%比53.3%±6.4）（图5B-E，浅灰色列）。用siponimod（3 nM）处理脱髓鞘蝌蚪，与对照组相比，GFP+细胞的数量增加了1.26倍（10.7±0.2比8.5±0.2）和1.37倍的视觉回避指数（75.0±4.5比54.5±5.4）。

然而，siponimod处理并没有导致平均游泳速度或行进距离的显著改善（图5B-E，深灰色列）。我们之前已经表明，在我们的爪蟾条件脱髓鞘模型中，西拉米辛和西地那非对髓鞘再生没有明显的影响。在脱髓鞘过程结束时加入西拉辛（5µM）或西地那非（1µM） 3天。通过计算每个视神经中GFP+细胞的数量，我们证实西拉斯辛和西地那非都不能改善髓鞘再生，正如预期的那样，它们对三种功能行为测试中的任何一种都没有显著影响（图5F-I）。

总之，这些数据证实了我们的条件脱髓鞘模型在筛选促进功能性脱髓鞘的药物效力方面的有效性。

鸣谢：Esther Henriet, et al. Brain. 2023 Mar 30;awad051.