流式细胞仪原理及产品推荐

流式细胞仪（Flow Cytometer）是一种通过对流动的细胞进行激光照射和荧光信号检测，分析细胞的特性（如大小、形态、表面标志物等）的仪器。其核心原理涉及将细胞以单个流动的状态引入流动通道，激光照射下散射光和荧光信号用于对细胞进行多参数分析。以下是流式细胞仪的工作原理的详细步骤：

1. 细胞准备和流动状态

   样品制备：首先，细胞悬液需要制备成单细胞状态，这样可以避免细胞群体之间的干扰。

   流动通道：细胞悬液被导入流式细胞仪的流动通道，通常通道非常窄，以确保细胞单个通过。流动通道内通常会使用液流推动细胞，以保持它们的单列状态，确保每个细胞能够逐一通过激光光束。

 2. 激光照射与散射光

   激光激发：当细胞流动通过激光束时，激光光会与细胞发生相互作用，细胞会散射光并发出荧光（如果有标记染料）。流式细胞仪通常使用多个激光（如488nm、633nm等），以便激发不同的荧光染料。

   前向散射光（FSC）：细胞的体积（大小）会影响激光的前向散射光（FSC）。FSC的强度通常与细胞的大小成正比。

   侧向散射光（SSC）：细胞的内含物（如颗粒、细胞核）会影响激光的侧向散射光（SSC）。SSC信号通常与细胞的复杂性（内在颗粒数量或核形态）成正比。

3. 荧光标记物的使用

   荧光染料标记：流式细胞术使用特定的荧光标记物（如FITC、PE、APC等）与细胞表面的抗原或细胞内成分结合。这些荧光标记物在激光照射下会发出特定波长的光，提供关于细胞表面或内含物的详细信息。

   多重标记：通过使用不同的荧光染料标记不同的分子，可以实现多重分析。例如，使用不同颜色的荧光标记CD4和CD8等免疫标志物，从而对免疫细胞亚群进行分类。

 4. 信号检测

   光电倍增管（PMT）：流式细胞仪中的多个光电倍增管（PMT）用于接收来自细胞的散射光和荧光信号。这些信号会被转换成电信号，并通过计算机进行数据处理。

   多个通道检测：现代流式细胞仪通常配有多个荧光检测通道，能够同时检测多个荧光标记物，并提供高维度的数据分析。

 5. 数据分析

   数据处理：每个细胞的散射光、荧光信号等数据会被记录并转换为数字信息。计算机通过专用的软件进行分析，通常包括散点图、直方图等图形展示。

   分析结果：分析结果可以揭示细胞的免疫表型、大小、形态、分布等特征，帮助研究人员进行细胞群体分析、亚群分选等。

流式细胞仪产品推荐

流式细胞仪的市场上有多种品牌和型号，适用于不同的研究需求。以下是一些知名的流式细胞仪品牌和推荐产品：

1. **BD Biosciences

BD Biosciences 是流式细胞仪领域的领导者之一，提供高性能的流式细胞仪和相关试剂。

BD FACSCanto™ II：适用于多参数分析，支持最大8个荧光标记。具有高分辨率和灵活性，广泛应用于细胞免疫学、癌症研究等领域。

BD FACSAria™ III：这是一款高性能的流式细胞分选仪，支持高通量细胞分选，适用于需要单细胞分选的研究，如干细胞分选、肿瘤免疫研究等。

2. Beckman Coulter

Beckman Coulter 是另一大流式细胞仪供应商，提供适合临床和研究用途的流式细胞仪。

CytoFLEX：具备灵活的配置选项和优异的多参数分析能力，适合各种研究领域，如免疫学、细胞生物学等。它的独特设计使其适用于高通量实验。

MoFlo Astrios EQ：这款仪器专为需要多参数分析的细胞分选设计，支持流式细胞分析和细胞分选的精确结合。

3. Thermo Fisher Scientific

Thermo Fisher 提供多种流式细胞仪，适用于基础研究、临床应用等领域。

Attune™ NxT Flow Cytometer：这款仪器拥有较高的灵敏度和通过高通量分析多达14种参数的能力。它具有优异的性能，适合复杂的细胞分析需求。

FACSVerse™ Flow Cytometer：适合中到高通量的分析，支持快速、准确的细胞分析，广泛用于免疫学、细胞功能研究等领域。

4. Miltenyi Biotec

Miltenyi Biotec 提供一系列流式细胞仪，尤其注重细胞分选。

MACSQuant® Tyto™：是一款紧凑型、便捷的流式细胞仪，提供高质量的细胞分析和分选，适用于小型实验室或需要高度自动化的应用。

5. Sony Biotechnology

Sony Biotechnology 提供创新型流式细胞仪，主要面向细胞分析和分选。

SH800™ Cell Sorter：具有高精度和高通量分选功能，支持多达6个荧光标记，适合流式细胞分选和细胞亚群分析。

选择流式细胞仪时的考虑因素：

1. 分析参数：根据需要分析的细胞特征和参数选择适当的仪器。例如，某些仪器支持多达10个以上的荧光标记，而另一些可能只有几个通道。

2. 分辨率：选择具有较高分辨率的设备，以便获得精确的细胞分析。

3. 通量和速度：高通量分析和快速分析对某些实验至关重要。

4. 分选能力：如果需要进行细胞分选，需要确保仪器具有高效、准确的分选功能。

5. 操作便捷性：易于操作的设备和友好的用户界面可以提高实验效率。

6. 预算：流式细胞仪的价格差异较大，选择适合自己实验需求和预算的设备至关重要。

根据研究的具体要求（如细胞分析的复杂性、需要的荧光标记数量等），选择合适的流式细胞仪可以大大提升实验效率和数据准确性。