流式细胞分选(Flow Cytometry Sorting,简称FACS)是一种高效的细胞分析技术,用于对单个细胞进行定量分析和分选。它通过流式细胞仪对细胞进行激光照射,激发细胞内部或表面的荧光标记物,收集细胞发出的荧光信号,从而分析和分选细胞。此技术可以用于研究细胞的大小、形态、DNA含量、蛋白表达等多种特征。
流式细胞分选的原理:
1. 细胞悬浮液:首先,将细胞制成单细胞悬液,并使用荧光染料标记目标细胞。
2. 流式细胞仪:细胞悬液通过流式细胞仪的流通管道,细胞单个通过激光束照射。激光激发细胞标记的荧光染料。
3. 信号检测:细胞发出的荧光信号、散射光信号等信息被光电倍增管(PMT)接收并转化为电信号。
4. 数据分析:分析软件对采集的信号进行分析,区分不同类型的细胞群体,并根据特定标记物的表达进行分类。
5. 细胞分选:根据分析结果,流式细胞仪将符合条件的细胞按预设的标准(如荧光强度、大小等)分选到不同的收集管中。
应用领域:
免疫学研究:如细胞亚群分析、免疫表型分析。
肿瘤学:肿瘤细胞的检测与分析,特别是肿瘤标记的表达。
干细胞研究:对干细胞的鉴定与分选。
临床诊断:如白血病和淋巴瘤的诊断。
基因表达分析:细胞内蛋白质或基因的定量检测。
优势:
高通量:可对成千上万的细胞进行分析和分选。
精确性:能准确分析和分选带有多重标记物的细胞。
自动化:能够快速、高效地完成细胞分选工作。
流式细胞分选技术具有重要的研究和应用价值,尤其在细胞生物学、医学和药物研发中得到了广泛的应用。