10、酶催化动力学与有效性分析

酶催化动力学与有效性分析

1. 再循环速率对反应速率的影响

再循环速率从 10 mL/min 增加到 350 mL/min 时，对于初始浓度分别为 1、10 和 100 g/L 的稀释淀粉，反应速率分别增加了 800%、212% 和 22.2%。较高底物浓度下反应速率增加幅度较低，这为存在外部扩散限制（EDR）提供了证据，因为如图所示，反应速率中 EDR 的影响在较高底物浓度时会降低。

2. 青霉素 G 酰化酶（PGA）固定化相关计算

将来自重组大肠杆菌的 PGA 固定在乙醛琼脂糖 6BCL 上，通过使 4.9 g 活化载体（密度 0.7 g/mL）与 3 mL 先前用 20 mL 100 mM pH 10 的碳酸氢盐缓冲液稀释的 PGA 提取物接触实现固定化。在固定化过程中获得的酶活性和蛋白质浓度数据如下表：
| 时间 (h) | 活性 (IU/mL) - 对照 | 活性 (IU/mL) - 上清液 | 活性 (IU/mL) - 悬浮液 | 上清液中蛋白质 (mg/mL) |
| — | — | — | — | — |
| 0 | 50 | 50 | 50 | 5 |
| 1 | 50 | 40 | 50 | 3.5 |
| 2 | 32 | 49 | 2.5 | |
| 3 | 50 | 25 | 48 | 2.1 |
| 4 | 10 | 47 | 1.8 | |
| 5 | 50 | 5 | 46 | 1.6 |
| 6 | 0 | 46 | 1.5 | |
| 7 | 50 | 0 | 46 | 1.5 |

根据这些数据可计算得到：
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