38、尘螨研究：从培养到过敏原解析

尘螨研究：从培养到过敏原解析

1. 尘螨样本采集与处理

1.1 加热与显微镜检查

将样本加热后，置于立体双目显微镜下检查是否存在活螨。这是初步判断样本中是否有尘螨的重要步骤，通过显微镜的放大作用，可以清晰地观察到尘螨的存在与否。

1.2 真空吸尘与悬浮提取

• 采样 ：以每 2 分钟 1 平方米的推荐速率对地毯进行真空采样，使用过滤系统或类似装置捕获尘螨。
• 处理 ：将附着在过滤器上的物质取下、称重，然后按以下步骤回收、称重和提取尘螨。
  • 将样本悬浮在 50 毫升饱和氯化钠溶液中，并加入湿润剂。
  • 搅拌悬浮液，通过孔径足够小的筛网过滤，以保留尘螨及其卵。
  • 使用 1% 结晶紫水溶液对筛网上的物质进行染色，该溶液可对除尘螨外的所有物质染色。
  • 冲洗后，将筛网中的物质与水一起转移到直径 9 厘米的玻璃培养皿中。在立体双目显微镜下，可通过观察弯月面或表面下方的活动来检测活螨。

1.3 处理后尘螨种群监测

应根据尘螨在培养微气候下的生命周期，以足够的间隔重复对活螨进行采样（约 3 周）。例如，处理后进行采样，然后每 2 周采样一次，共进行四次处理组和对照组的采样。

1.4 统计处理

采用适当的统计方法比较处理组和对照组尘螨种群密度的变化率至关重要。需注意，上述研究设计属于重复测量设计，因此应仅使用适用于重复测量的统计方法