42、AAV载体的制备与脊髓注射技术详解

AAV载体的制备与脊髓注射技术详解

1. AAV载体技术概述

AAV（腺相关病毒）载体在基因治疗和神经科学研究中具有重要作用。利用特定启动子片段在中枢神经系统（CNS）的其他区域（如视网膜）已展现出强大的功能。像ATAC - seq等新技术有望鉴定出众多新的细胞类型特异性启动子/增强子片段，未来可用于驱动特定脊髓亚群中效应基因的表达，从而避免使用转基因小鼠，并使AAV载体介导的回路操作更易扩展到其他哺乳动物。此外，AAV载体递送与CRISPR/Cas9技术的结合，可在有丝分裂后神经元中实现体细胞突变，将AAV载体递送的转基因敲入到特定的内源性基因中，这一技术未来可用于直接操纵脊髓中与疼痛传导相关的内源性基因。

2. 实验材料准备

2.1 HEK 293T细胞相关材料

<

材料名称	规格	储存条件
AAVpro® 293T细胞系	TaKaRa, 632,273	液氮气相
Mycoplasmacheck	Eurofins Genomics	/
组织培养板	生长面积152 cm², Sarstedt, 83.3903或等效产品	/