基于纸基微流控的核酸检测技术:进展与应用
1. 纸基微流控芯片上样本制备与核酸分析的集成
早期,纸基微流控芯片主要作为独立平台,分别用于样本制备/纯化、扩增或终端分析。尽管在核酸分析的各个独立步骤中,纸基微流控芯片已取得显著进展,但为实现即时检测(POC),仍迫切需要一个能将所有核酸分析过程完全集成的系统,即“样本进 - 结果出”模式。理想情况下,将核酸分析集成到单个纸基微流控芯片中,尽量减少其他材料的使用,对于满足设备简单、诊断便捷、适用于资源有限地区以及成本可承受等需求至关重要。
1.1 不同类型的集成纸基微流控芯片
- 基于滑动条的纸机平台 :2015 年,Connelly 等人报道了一种在 FTA 纸上配备滑动装置的环介导等温扩增(LAMP)平台,用于从人血浆中集成分析大肠杆菌。该平台通过在磁性滑动条装置内简单滑动纸张,完成细胞裂解、DNA 提取、洗涤和 LAMP 扩增等整个核酸分析过程。其对大肠杆菌 malB 基因的 LAMP 扩增效率高,分析灵敏度可达一个双链 DNA 目标拷贝,检测限为五个细胞。此平台虽仍需紫外光源和成像设备分析结果,但在消除使用台式仪器(如离心机、移液器和涡旋混合器)方面具有潜力。
- 集成纸基侧向流动格式平台 :Choi 等人开发了一种集成纸基侧向流动格式平台,用于检测加标样本中的大肠杆菌和血液样本中的肺炎链球菌。该平台使用 Fast Technology Analysis(FTA)卡和玻璃纤维分别作为目标核酸提取和扩增的底物,并结合疏水聚氯乙烯(PVC)作为阀门,控制流体从提取区到扩增区和侧向流动条的流动。该平台能够通过 LAMP 成功
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