哺乳表达载体|重组蛋白表达-卡梅德生物

文章介绍了哺乳动物细胞中常用的表达载体,如pCAGGS、pCMV-Sport6、pLenti-CMV-GFP-P2A-Puro和pEF6/V5-His,强调了它们的特点、优缺点及选择时需考虑的因素,如目的蛋白特性、表达效率和纯化难度。卡梅德生物的载体提供高效多样的选择。

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在哺乳动物表达系统中,选择合适的载体对目的蛋白的表达和功能研究至关重要。以下是一些常用的哺乳动物表达载体及其特点:
1 pCAGGS载体:这是将CAG promoter与pBluescript II SK(-)载体相结合构建的一种常用于哺乳动物细胞表达的载体。CAG promoter具有强启动子和高效转录的特点,可以驱动目的基因的高水平表达。该载体的优点是转染效率高、表达稳定,适用于瞬时和稳定表达。
2 pCMV-Sport6载体:这个载体是Clontech公司开发的用于哺乳动物细胞表达的载体。pCMV-Sport6载体含有CMV promoter,可以驱动目的基因的快速和稳定表达。该载体的优点是具有较高的转染效率和稳定性,适用于瞬时和稳定表达。
3 pLenti-CMV-GFP-P2A-Puro载体:这是将慢病毒载体和CMV promoter相结合的一种哺乳动物细胞表达载体。该载体具有高效整合、长期稳定表达的特点,适用于基因治疗和基础研究。
4 pEF6/V5-His载体:这是Invitrogen公司开发的用于哺乳动物细胞表达的载体。pEF6/V5-His载体含有EF1alpha promoter,可以驱动目的基因的高水平表达,同时具有较好的翻译效率和稳定性。该载体的优点是适用于稳定表达和蛋白质纯化。


以上这些载体在选择时需要根据其特点进行设计和选择,其优缺点分析如下:
1 pCAGGS载体:
优点:强启动子,转染效率高,表达稳定。
缺点:可能与宿主基因组整合,存在一定的安全风险。
2 pCMV-Sport6载体:
优点:转染效率高,稳定性好,适用于多种哺乳动物细胞。
缺点:启动子可能会受到宿主细胞内源性RNA聚合酶的影响,导致表达水平波动。
3 pLenti-CMV-GFP-P2A-Puro载体:
优点:高效整合,长期稳定表达,适用于基因治疗和基础研究。
缺点:制备过程复杂,可能产生免疫反应。
4 pEF6/V5-His载体:
优点:适用于稳定表达和蛋白质纯化,翻译效率和稳定性较好。
缺点:启动子较小,可能不适合大型基因的克隆和表达。
选择哺乳动物表达载体时需考虑的因素包括:目的蛋白的表达水平、蛋白质加工和修饰、载体的稳定性、转染效率以及生产成本等。此外,还应考虑宿主细胞的特性、培养条件以及表达产物的纯化难易程度等因素。卡梅德生物自主研发改造的哺乳表达载体优势明显,表达效率高,适合多种类型蛋白表达,为科研学者提供了更多的选择。

 

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