酵母表达载体｜蛋白表达技术介绍

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于 2023-12-24 13:37:11 首次发布

文章介绍了酵母表达系统中常用的五种载体（pPICZ、pYEX、pYES2.0、pYES2/CT-LEU和pHIL-D2），强调了选择载体时需考虑目的蛋白表达水平、加工修饰、载体稳定性、筛选标记及生产成本等因素，以及与宿主菌特性和表达产物纯化相关的考虑。

在酵母表达系统中，载体的选择非常重要，因为载体决定了目的蛋白的表达效率、蛋白质的加工和修饰等。以下是几种常用的酵母表达载体及其特点和选择原因：
第一种：pPICZ系列载体：这是Invitrogen公司开发的用于酿酒酵母表达的载体。pPICZ载体含有AOX1启动子，可实现目的基因的高水平表达。该载体还含有Zeocin抗性基因，方便筛选含有目的基因的转化子。
第二种：pYEX系列载体：是Clontech公司开发的用于酵母表达的载体。pYEX载体使用组成型启动子，可实现目的基因的稳定表达。此外，该载体含有金属离子抗性基因，方便筛选含有目的基因的转化子。
第三种：pYES2.0载体：这是Invitrogen公司开发的用于酿酒酵母表达的载体。pYES2.0载体含有组成型启动子，可实现目的基因的稳定表达。此外，该载体含有URA3基因，方便筛选含有目的基因的转化子。
第四种：pYES2/CT-LEU载体：这是Invitrogen公司开发的用于酿酒酵母表达的载体。pYES2/CT-LEU载体含有组成型启动子，可实现目的基因的稳定表达。此外，该载体含有LEU2基因，方便筛选含有目的基因的转化子。
第五种：pHIL-D2载体：这是Promega公司开发的用于毕赤酵母表达的载体。pHIL-D2载体含有强组成型启动子，可实现目的基因的高水平表达。此外，该载体含有HIS4基因和MEL1基因，方便筛选含有目的基因的转化子。
在#重组蛋白表达服务#过程中，选择酵母表达载体时需考虑的因素包括：目的蛋白的表达水平、蛋白质加工和修饰、载体的稳定性、筛选标记以及生产成本等。此外，还应考虑宿主菌的特性、培养条件以及表达产物的纯化难易程度等因素。