在重组蛋白表达领域,标签(tag)的选择至关重要,尤其是那些能有效提升目标蛋白溶解度和表达量的“小标签”。其中,NEXT tag 作为一种源自天然 α‑型碳酸酐酶(CA)N 端延伸序列的小肽标签,因其独特优势逐渐受到关注。
01
起源与发明人
NEXT tag 源自海洋菌 Hydrogenovibrio marinus 的 α‑型碳酸酐酶(hmCA)N‑端延伸区,由 53 个氨基酸组成(约 5.5 kDa)。Byung Hoon Jo 等人在研究中首次将其提炼为一种能显著提升重组蛋白可溶性与表达量的融合标签。
02
NEXT tag 的氨基酸序列
NEXT tag 的氨基酸序列如下:
AVQHSNAPLIDLGAEMKKQHKEAAPEGAAPAQGKAPAAEAKKEEAPKPKPVV
该序列由 53 个氨基酸组成,分子质量约为 5.5 kDa。研究表明,NEXT tag 是一种“内在无序肽”(IDP),能够通过熵效应排斥周围大分子,从而抑制目标蛋白聚集,特别适合解决低表达、易聚集蛋白的问题。
03
应用领域
NEXT tag 是一段“内在无序肽”(intrinsically disordered peptide,IDP),能够通过熵效应排斥周围大分子,从而抑制目标蛋白聚集,特别适合解决低表达、易聚集蛋白的问题。相比传统大标签(如 MBP ~40 kDa、GST ~26 kDa),NEXT tag 更小,对目标蛋白结构和功能影响极小。
04
实验设计
| 1.体内溶解度实验( |

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