25、清醒小鼠膜片钳实验指南

清醒小鼠膜片钳实验指南

在神经科学研究中，清醒小鼠膜片钳技术是一项重要的实验方法，它能够帮助我们深入了解神经元的电活动特性。下面将详细介绍该实验所需的材料、方法以及相关注意事项。

1. 实验材料

实验材料主要分为以下几个部分：
- 实验动物 ：选用4 - 8周大的C57Bl6J小鼠。
- 植入手术材料 ：
- 麻醉相关：Vapomatic麻醉蒸发器（VIP3000异氟烷，MDS Matrx）和Attane异氟烷（Provet）。
- 立体定位装置：鼻夹（定制）或小动物立体定位框架（Kopf）。
- 加热毯：DC温度控制模块、加热垫和浸入式加热棒（FHC）。
- 手术器械：精细剪刀、带手柄的一次性手术刀刀片、刮刀。
- 头柱（定制）：L形头柱，与颅骨最大接触，便于接近大部分脑区。
- 其他：眼科凝胶（Viscotears，诺华）、局部防腐剂（碘伏）、2%过氧化氢溶液、棉签、氰基丙烯酸酯胶水（乐泰超级强力胶401，汉高）、丙烯酸牙科水泥（Paladur粉色粉末67407963和Paladur液体，Kaladent）、硅胶密封剂（Kwik - Cast，WPI）、卡洛芬（辉瑞）。
- 适应期材料 ：头柱固定器（定制），提供最大稳定性和灵活性。
- 颅骨切开材料 ：
- 林格氏溶液：含135 mM NaCl、5 mM KCl、5 mM HEPES、1 mM MgCl₂和1.8 mM CaCl₂（用NaOH调至pH 7.3）。
- 立体显微镜