序列比对(alignment)

本文介绍了如何使用NCBI的BLAST进行核苷酸或蛋白质比对,并详细步骤演示了MEGA软件中序列文件的导入与ClustalW比对,以及系统发育树的构建过程。

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序列比对(alignment)

1 使用NCBI进行BLAST

1、进入NCBI官网(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)
Alt
2、点击右上角BLAST
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3、核苷酸比对选择 Nucleotide BLAST,氨基酸比对选择 Protein BLAST (以核苷酸比对为例),复制需要比对的序列,自行选择比对的数据库,进行BLAST即可获得比对结果
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4、如果需要比对两条序列间的碱基差异,可勾选 Align two or more sequences
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2 使用MEGA进行比对

1、用MEGA软件导入需要比对的序列文件,点击Alignment,选择Align by ClustalW 进行比对
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2、点击Data中的Phylogenetic Analysis,返回到MEGA界面,点击Phylogeny,选择构建系统发育树(Maximum Likelihood、Neighbor-joining 和 Minimum Evolution method)

在生物信息学研究中,NCBI提供了丰富资源与强大工具用于基因序列的查询、引物设计及序列比对。首先,您可以通过NCBI的Gene数据库来查找特定基因的序列信息。以IL6基因为例,输入'IL6 human'到搜索框中,选择正确的物种(例如Homo sapiens),即可获得IL6基因的相关信息。接下来,进入Map Viewer查看IL6基因在染色体上的位置,选择合适的参考序列以获取精确的基因位置信息。 参考资源链接:[NCBI使用教程:基因序列到BLAST比对的全面指南](https://wenku.youkuaiyun.com/doc/4sw9ajxrwv?spm=1055.2569.3001.10343) 转到NCBI的BLAST页面,选择适合您序列类型的BLAST工具,例如nucleotide BLAST用于核苷酸序列比对。上传您的IL6基因序列,选择适当的数据库进行比对,如在本例中选择“refseq_genomic”,然后启动BLAST搜索。BLAST会分析返回的结果,显示与您输入序列相似的数据库记录,您可以根据这些信息判断引物设计的特异性。 在引物设计方面,您可以利用Primer-BLAST工具,它结合了引物设计与序列比对功能。输入您想要设计引物的IL6基因区域,Primer-BLAST会自动进行引物设计,并使用BLAST算法检查引物序列的特异性,确保它们只与目标基因区域进行配对,避免非特异性匹配。 总之,通过NCBI的Gene数据库、Map Viewer以及BLAST工具,您可以有效地进行基因序列的查找、引物设计以及序列比对,确保您的研究设计具备科学性和准确性。 参考资源链接:[NCBI使用教程:基因序列到BLAST比对的全面指南](https://wenku.youkuaiyun.com/doc/4sw9ajxrwv?spm=1055.2569.3001.10343)
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