20190904_chip-seq/ ATAC-seq/DAP-seq 原理理解

染色质免疫共沉淀Chromatin Immunoprecipitation,ChIP 技术是指:在保持组蛋白和DNA联合的同时,通过运用对应于一个特定组蛋白标记的生物抗体,染色质被切成很小的片断,并沉淀下来。该技术是目前唯一研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法

它的基本原理是在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物,并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学方法沉淀此复合体特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段通过对目的片断的纯化与检测从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。CHIP不仅可以检测体内反式因子与DNA的动态作用,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系。而且,CHIP与其他方法的结合,扩大了其应用范围:CHIP与基因芯片相结合建立的CHIP-on-chip方法已广泛用于特定反式因子靶基因的高通量筛选;CHIP与体内足迹法相结合,用于寻找反式因子的体内结合位点;RNA-CHIP用于研究RNA在基因表达调控中的作用。

反式因子 trans-acting element是转录模板上游的一类蛋白调节因子,包括激活因子和阻遏因子等,它们与顺式作用元件中的上游激活序列特异性结合,对真核生物基因的转录分别起促进和阻遏作用。

顺式作用元件(cis-acting element)存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列。是转录调节因子的结合位点。顺式作用元件包括启动子

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