七鳃鳗:脊椎动物研究的理想模型
1. 七鳃鳗基因功能研究的新利器——CRISPR/Cas9系统
在脊椎动物发育机制的研究中,七鳃鳗作为一种独特的模型生物正发挥着越来越重要的作用。传统的基因敲低技术,如通过吗啉代寡核苷酸(morpholinos)或RNA干扰(RNAi)来研究基因功能,存在一定的局限性。而近年来,基因技术的进步为研究带来了新的突破,CRISPR/Cas9系统应运而生。
CRISPR/Cas9系统具有高效、经济且适应性强等优点,逐渐成为研究基因功能的首选技术。它基于相对简单的实验设计,能够精确地对生物体的基因组进行瞬时或跨代的改变。与其他早期开发的基因组编辑技术(如TALEN、锌指核酸酶)相比,CRISPR/Cas9系统在改变基因组DNA方面表现得更为出色。
多个实验室的研究成果充分展示了CRISPR/Cas9系统在七鳃鳗胚胎基因功能研究中的强大威力。Medeiros实验室首次成功地在七鳃鳗胚胎中应用了CRISPR/Cas9技术。他们首先靶向酪氨酸酶(Tyrosinase,Tyr)的基因组编码序列,该酶在色素细胞中催化黑色素的产生。通过破坏Tyr基因,他们获得了大量的白化幼虫,并将这些表型与靶向的Tyr基因座的突变联系起来。随后,研究人员发现通过CRISPR进行的靶向基因组破坏可以轻松扩展到其他基因座,如FGF8/17/18,其突变分别导致了咽软骨细胞和肌肉中SoxE1和Mef2的表达降低。
同样,Weiming Li及其同事通过在七鳃鳗胚胎的Golden(gol)Kctd10、Wee1、SoxE2和Wnt7b基因座上高效诱导插入或缺失(indels),展示了CRISPR/Cas9系统的多功能性。McCauley实验室最近利用CRISPR技术在七鳃鳗胚胎中
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