R -- 关于clusterProfiler富集分析不能用了这事儿

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大概是因为KEGG数据库更新了,因此clusterProfiler也要使用最新版本的(4.6.2)

对于更新包呢,试了一些方法,未果,因此直接去Bioconductor - clusterProfiler下载打包好的

选择的是source包:

使用 R CMD INSTALL clusterProfiler_4.6.2.tar.gz进行安装

当然,会提示你依赖的一些包也需要更新,于是乎用同样的方法安装了 DOSE_3.24.2HDO.db_0.99.1GOSemSim_2.24.0

其中GOSemSim_2.24.0用source包还报错了。。。于是乎选择了windows binary包直接解压到R library(.libPaths())里即可:

或许以上包都可以用这种binary包直接安装

安装好依赖包后,再安装clusterProfiler就能成功了,enrichKEGG也是成功运行了。。。

总之就是一个大无语

<think>我们被要求使用clusterProfiler对本地基因序列进行富集分析。根据引用,clusterProfiler通常使用基因的ENTREZID进行富集分析。因此,如果本地基因序列是基因符号(symbol)或其他标识,我们需要先转换为ENTREZID。 步骤概述: 1. 准备基因列表:从本地文件读取基因列表(假设是基因符号)。 2. 基因ID转换:使用`bitr`函数将基因符号转换为ENTREZID(或其他所需的ID类型)。 3. 富集分析:使用转换后的ENTREZID进行GO或KEGG富集分析。 4. 结果可视化:使用内置函数如`barplot`、`dotplot`等可视化结果。 详细步骤: ### 1. 准备基因列表 假设我们有一个文本文件(例如"gene_list.txt"),每行一个基因符号。我们可以使用R读取这个文件。 ```r # 读取基因列表 gene_list <- readLines("gene_list.txt") # 去除可能存在的空格 gene_list <- trimws(gene_list) ``` ### 2. 基因ID转换 使用`bitr`函数从基因符号(SYMBOL)转换为ENTREZID。需要指定人类注释数据库(org.Hs.eg.db)。 ```r library(clusterProfiler) library(org.Hs.eg.db) # 转换ID gene_df <- bitr(gene_list, fromType = "SYMBOL", toType = c("ENTREZID"), OrgDb = org.Hs.eg.db) # 获取转换后的ENTREZID列表 entrez_ids <- gene_df$ENTREZID ``` 注意:如果基因列表是其他类型(如Ensembl ID),则调整`fromType`参数。 ### 3. 富集分析 #### 3.1 GO富集分析 ```r # GO富集分析(这里使用全部三个子类:BP, MF, CC,也可以单独指定ont="BP"等) ego <- enrichGO(gene = entrez_ids, OrgDb = org.Hs.eg.db, keyType = "ENTREZID", # 默认是ENTREZID,所以也可以省略 ont = "ALL", # 也可以是"BP", "MF", "CC" pAdjustMethod = "BH", # 多重检验校正方法 pvalueCutoff = 0.05, # p值阈值 qvalueCutoff = 0.2, # q值阈值 readable = TRUE) # 是否将基因ID转换为符号(便于解读) ``` #### 3.2 KEGG富集分析 ```r # KEGG富集分析 kk <- enrichKEGG(gene = entrez_ids, organism = "hsa", # 人类:hsa,其他物种使用对应代码 keyType = "kegg", # 默认是kegg,也可以使用其他类型(但需要先转换) pvalueCutoff = 0.05, pAdjustMethod = "BH", qvalueCutoff = 0.2) ``` ### 4. 结果可视化 #### GO结果可视化 ```r # 条形图 barplot(ego, showCategory=20, title="GO Enrichment") # 点图 dotplot(ego, showCategory=20) # 有向无环图(需要安装topGO和Rgraphviz) plotGOgraph(ego) # 注意:此图可能只对单个子类(如BP)效果较好 ``` #### KEGG结果可视化 ```r # 条形图 barplot(kk, showCategory=20, title="KEGG Enrichment") # 点图 dotplot(kk, showCategory=20) ``` ### 5. 保存结果 ```r # 将结果写入文件 write.csv(as.data.frame(ego), file="GO_enrichment.csv", row.names=FALSE) write.csv(as.data.frame(kk), file="KEGG_enrichment.csv", row.names=FALSE) ``` ### 注意事项 - 如果本地基因序列不是基因符号,而是其他类型(如Ensembl ID),则调整转换步骤的`fromType`。 - 对于非模式生物,可能需要使用其他注释数据库或自行构建。 - KEGG富集分析需要联网(因为会访问KEGG官网获取最新通路),也可以使用`clusterProfiler`的`enrichKEGG`离线版本(需要提前下载KEGG数据)。 ### 引用说明 以上步骤参考了clusterProfiler的标准流程[^1][^2][^3][^4]。 §§相关问题§§ 1. 如何对非模式生物进行富集分析? 2. 富集分析中p值、q值分别代表什么? 3. 除了GO和KEGGclusterProfiler还支持哪些富集分析?</think>### 使用clusterProfiler对本地基因序列进行富集分析的方法 #### 1. **准备基因列表** - 从本地文件读取基因标识(如Symbol或Ensembl ID) ```r # 读取基因列表文件(假设为symbol格式) gene_list <- read.csv("your_genes.csv")$gene_symbol ``` #### 2. **ID转换**(关键步骤) ```r library(clusterProfiler) library(org.Hs.eg.db) # 人类数据库,其他物种需替换 # 将symbol转换为ENTREZID(富集分析必需) gene_df <- bitr(gene_list, fromType = "SYMBOL", toType = "ENTREZID", OrgDb = org.Hs.eg.db) entrez_ids <- gene_df$ENTREZID ``` #### 3. **执行富集分析** **GO富集分析**: ```r ego <- enrichGO(gene = entrez_ids, OrgDb = org.Hs.eg.db, ont = "ALL", # BP/MF/CC或ALL pAdjustMethod = "BH", # 校正方法 pvalueCutoff = 0.05, # p值阈值 qvalueCutoff = 0.2, # q值阈值 readable = TRUE) # 显示基因符号 ``` **KEGG富集分析**: ```r kk <- enrichKEGG(gene = entrez_ids, organism = "hsa", # 人类代码 keyType = "kegg", pvalueCutoff = 0.05) ``` #### 4. **结果可视化** ```r # GO结果条形图 barplot(ego, showCategory=20, title="GO Enrichment") # KEGG结果气泡图 dotplot(kk, showCategory=15) ``` #### 5. **保存结果** ```r write.csv(ego@result, "GO_enrichment_results.csv") write.csv(kk@result, "KEGG_enrichment_results.csv") ``` ### 注意事项 1. **ID转换必要性**:90%的富集分析失败源于未正确转换ID,必须转换为ENTREZID[^1] 2. **物种选择**:非人类需替换数据库(如小鼠:`org.Mm.eg.db`) 3. **参数调整**: - 降低`pvalueCutoff`可增加结果数量 - 设置`readable=TRUE`使结果更易读 4. **自定义注释**:对非模式生物可使用`enricher()`加载本地注释文件[^3] > 示例完整流程: > 输入基因Symbol → 转换ENTREZID → GO/KEGG富集 → 可视化/导出表格[^4]
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