IT人们给个建议 - SOUTHER

一位中学教师兼业余开发者寻求.NET领域的技术专精之路,希望获得关于.NET核心技术的学习建议。
原帖地址:http://www.cnblogs.com/souther/p/3156296.html

开篇声明:我本身是中学老师,师范类大学计算机专业毕业,现在马上研究生学位就要拿上了,平时在学校搞网络维护什么的,事少,业余时间充足,也不想拘泥于做老师拿点工资,觉得白学计算机了,所以也搞些业余开发,如做网站了,做些系统之类的,但是一直没有精通到某一项技术,现在发现几年过去了,好多东西都是听过,真正会用都没有,再这样下去不是个办法,所以想在.NET领域研究个技术,能够有所成,常期上博客园让我了解到,像ASP.NET MVC,EF,NH,WCF等,都是些核心技术,我知道他们作用不同,不能直接这样来分类,但是技术相通,研究其中一个,其它应该也免不了用上,比如研究MVC,肯定用到相关数据库技术,所以想请高手们经个建议,我应该如何下手,从那里开始,这样不枉费年华。

我的自身条件:我有CS或BS开发经验(.NET),CS算起来就是开发过一个给移动公司做话务分析的系统,BS主要是些网站什么的,或者公司内部使用的订单处理系统之类,做这些东西时,都是要做什么功能,网上找方法,找到可用的代码或方法,直接改,完成功能为原则,没有足够深入。搞网站基本一人搞定前后台,前端JQUERY,js,css均有了解,处理基本问题够了,复杂的东西只能google。

我的所求:

1、请在.NET技术 方面指条方向,比如博客员左侧分类中的技术,同时如能指明学习思路,那更加感激了

2、相信和我这样的人也是有不少的,博客园专家要是能给个建议,那更是受益匪浅了

3、可以拜师学艺,付费或者免费均可参考,如果专家们高风亮节,收为弟子,则受宠若惊,则必将严守师门规定

4、诚恳求教,同仁勿喷啊!


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### Southern Blot 的电泳检测方法与原理 Southern blot 是一种用于分析 DNA 的分子生物学技术,主要用于检测特定 DNA 序列的存在与否以及其大小。以下是关于该技术的详细说明: #### 一、实验流程概述 Southern blot 技术的核心在于通过一系列操作实现目标 DNA 片段的选择性分离和检测。具体步骤如下: 1. **样品制备** 需要提取待研究样本中的总 DNA 并进行酶切处理,以便将完整的基因组 DNA 切割成较小的片段。 2. **凝胶电泳** 使用琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶对切割后的 DNA 进行分离。不同长度的 DNA 片段会因迁移速度差异而在凝胶中形成不同的条带分布。 3. **DNA 变性** 在完成电泳之后,需对凝胶上的双链 DNA 进行变性处理使其成为单链状态,这一过程通常使用碱液来完成[^1]。 4. **转移至固相支持物** 将经变性的单链 DNA 转移到硝酸纤维素膜或者尼龙膜上。此步骤可通过毛细管作用力由湿盐溶液驱动完成,在此过程中保持各片段原有位置关系不发生改变[^2]。 5. **探针杂交** 接下来利用带有放射性标记或其他可探测标志物的特异性寡核苷酸作为探针对转印到膜上的靶序列实施杂交互补配对反应。 6. **信号检测** 经过洗涤去除未结合部分后,最后采用适当手段读取并记录下所形成的杂交图案信息即可得出结论。 #### 二、关键技术要点解析 - **变性方式的区别**: 相较于 Northern blot 中使用的化学试剂(如甲醛),Southern blot 更倾向于简单有效的氢氧化钠溶液来进行高效彻底的 DNA 解旋工作。 - **固定条件优化**: 对已经成功转移到固体介质表面的目标核酸物质加以高温烘干等方式进一步增强它们之间的相互吸引力从而达到长期稳定保存的目的。 - **高灵敏度探针设计**: 合适的设计能够显著提高最终结果解读准确性的同时减少背景噪音干扰现象的发生几率。 ```python # Python 示例代码展示如何模拟简单的数据可视化效果 import matplotlib.pyplot as plt def plot_southern_blot(data): fig, ax = plt.subplots() ax.bar(range(len(data)), data) ax.set_title('Simulated Southern Blot Pattern') ax.set_xlabel('Fragment Position (bp)') ax.set_ylabel('Intensity') example_data = [10, 20, 30, 40, 50] plot_southern_blot(example_data) plt.show() ``` 上述脚本仅提供了一个非常基础的概念化表示形式,并不代表实际实验室条件下获得的真实图像质量水平。
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