细胞培养的成功与否,很大程度上取决于培养基的 “营养配比” 是否合理。如同烹饪需要精准控制调料比例,培养基中各成分的种类与含量也直接影响细胞的状态 —— 成分失衡可能导致细胞生长停滞、形态异常甚至死亡。本文将详细解析培养基中关键成分的作用及应用要点,为细胞培养实验提供参考。

一、缓冲体系:维持细胞适宜 pH 环境的核心
细胞对环境 pH 值变化极为敏感,缓冲体系是维持培养基 pH 稳定(通常为 7.2-7.4)的关键。实际操作中,若开盖时间较长,可适当补充 HEPES 以稳定 pH。
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碳酸氢钠
最常用的缓冲成分,通过与培养箱中的 CO₂形成 “碳酸氢钠 - 碳酸” 可逆反应调节 pH。其作用依赖 5%-10% CO₂的培养环境,若脱离培养箱时间过长,缓冲能力会显著下降。 -
HEPES
无需依赖 CO₂即可发挥缓冲作用,适用于长时间细胞操作(如流式染色、药物处理)或对 CO₂敏感的细胞培养。但成本较高,长期使用可能对部分细胞的生长产生潜在影响。 -
磷酸盐
缓冲能力强且毒性低,可稳定 pH 在 7.0-7.4,广泛应用于细菌培养及哺乳动物细胞培养中。
二、碳源:细胞能量代谢的 “动力源”
碳源为细胞提供能量及生物合成的碳骨架,其中葡萄糖是最常用的碳源。
- 葡萄糖
大多数细胞可快速利用葡萄糖通过糖酵解等途径生成 ATP。根据浓度不同,可分为高糖(4.5g/L)和低糖(1.0g/L)两种:- 高糖培养基适合代谢旺盛的细胞(如肿瘤细胞);
- 低糖培养基更适合代谢速率较慢的细胞(如成纤维细

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