AbMole| Puromycin dihydrochloride（M3637；CL13900 dihydrochloride； 嘌呤霉素）

盐酸嘌呤霉素Puromycin dihydrochloride (CL13900 dihydrochloride) 是一种氨基核苷类抗生素，作为蛋白质合成抑制剂。可用于构建肾病模型。

一、化学性质/溶解性/储存

分子量	544.43
分子式	C22H29N7O5.2HCl
CAS号	58-58-2
中文名称	嘌呤霉素
溶解性（仅列举部分溶剂）	Water ≥ 30 mg/mL
储存条件	-20°C, dry, sealed
运输方式	冰袋运输，根据产品的不同，可能会有相应调整。

*不同实验中用到的溶剂可能不同，具体实验所需溶剂及溶解方法请参考相关文献描述。

二、生物活性

盐酸嘌呤霉素Puromycin dihydrochloride (CL13900 dihydrochloride) 是一种氨基核苷类抗生素，作为蛋白质合成抑制剂。Puromycin有两种抑制作用模式。第一种是作为接受底物，攻击P位点的肽基tRNA，形成新生肽。第二种是通过与氨基酰-tRNA竞争结合到A'位点。

Puromycin对原核和真核生物的翻译过程均有干扰作用。对瞟吟霉素的抗性取决于编码瞟吟霉素N-乙酰转移酶(PAC)的 Pac基因。含pac基因的质粒/慢病毒转染/感染细胞后，细胞表达pac基因，因而获得Puromycin抗性，Puromycin即可用于细胞筛选。

三、作用原理与机制

嘌呤霉素的作用机制主要是抑制蛋白质合成。

结构模拟：在蛋白质合成过程中，核糖体沿着mRNA移动，将一个个由tRNA携带的氨基酸连接起来，形成多肽链。每个氨酰-tRNA的3‘端都是一个共价连接了特定氨基酸的腺苷酸（Aminoacyl-adenosine）.嘌呤霉素的结构与氨酰-tRNA的3’端（特别是酪氨酰-tRNA）高度相似。

进入核糖体：核糖体无法有效区分嘌呤霉素和真正的氨酰-tRNA。因此，在蛋白质延伸过程中，嘌呤霉素会进入核糖体的A位（氨酰-tRNA结合位点）。

肽链转移与提前终止：核糖体上的肽基转移酶中心会将正在生长的肽链（位于P位的肽酰-tRNA上）转移给嘌呤霉素的氨基，而不是转移给下一个正常的氨酰-tRNA。由于嘌呤霉素与肽链之间是通过酰胺键连接的，而不是像正常tRNA那样通过酯键连接，这个键非常稳定且无法被进一步延伸。

肽链释放与核糖体功能障碍：含有嘌呤霉素的短肽会从核糖体上提前释放出来，导致蛋白质合成提前终止。释放的核糖体也无法继续进行正常的翻译过程。

总结机制： 嘌呤霉素通过“冒充”氨酰-tRNA，导致肽链提前终止和释放，从而有效地、不可逆地抑制了原核和真核细胞的蛋白质合成。

四、应用领域

基于其独特的作用机制，嘌呤霉素在生命科学研究和生物技术中有着广泛而重要的应用。

作为筛选剂（最主要的应用）这是嘌呤霉素最常见的用途，尤其是在稳定细胞系构建中。将“嘌呤霉素N-乙酰转移酶（PAC）”的耐药基因通过质粒DNA转染到目标细胞中。表达PAC基因的细胞能够将嘌呤霉素乙酰化，使其失活，从而获得抗性。

蛋白质合成抑制的阳性对照：在实验中，当需要验证某种处理（如应激、药物、基因敲低）是否通过抑制蛋白质合成来发挥作用时，可以使用嘌呤霉素作为阳性对照。如果嘌呤霉素处理组和实验组都显示出相似的蛋白质合成抑制现象，则能佐证实验结果的可靠性。

检测蛋白质合成速率：利用其能被掺入新生肽链并导致其释放的特性，可以用标记的嘌呤霉素（例如，荧光标记或放射性标记的）来检测和量化细胞或无细胞系统中的蛋白质合成速率。被掺入的标记嘌呤霉素量可以间接反映新蛋白的合成量。

在研究自噬中的应用：自噬是细胞降解自身成分的过程。在研究自噬流时，科学家利用“荧光标记的嘌呤霉素”来追踪新合成蛋白质的命运。通过结合自噬抑制剂或诱导剂，可以观察新合成蛋白是如何被选择性自噬降解的。

作为抗生素：虽然由于其对人体的毒性（因为真核细胞也敏感）不能用于临床治疗，但嘌呤霉素在细胞培养中可用于清除支原体污染，因为支原体是原核生物，对其非常敏感。