AbMole|Calcein-AM/PI活死细胞双染试剂盒（目录号M55257）

AbMole Calcein-AM/PI活死细胞双染试剂盒通过Calcein-AM和PI的双重染料，来进行活细胞和死细胞的双重染色标记，从而进行活细胞和死细胞水平的分析。本试剂盒适用于荧光显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪等荧光检测系统。本试剂盒可以应用于大多数的真核哺乳动物细胞，但不适用于细菌和真菌。

本试剂盒内含有钙黄绿素-AM (Calcein-AM)和碘化丙啶 (PI)，Calcein AM 是在传统的Calcein上添加上乙酰甲氧基甲酯即（AM）基团，疏水性增加，能很容易穿透活细胞膜，进入细胞内。Calcein AM本身无荧光，进入细胞后被细胞中内源性酯酶水解，生成具有强负电荷且不能通过细胞膜的极性分子Calcein滞留在细胞内，而Calcein可发出强绿色荧光（Ex/Em= 494nm/517nm）。由于死细胞缺乏酯酶，不能或很少能产生Calcein，因此仅活细胞会被染色为强绿色荧光，死细胞不能被染色或者染色非常弱。PI不能透过活细胞的细胞膜，死细胞的细胞膜选择透过性丧失，碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）可以进入胞内与双链DNA特异性结合并产生强烈的红色荧光（Ex/Em=535nm/617nm），从而对死细胞进行标记。因此，Calcein AM与碘化丙啶联合使用，可以对活细胞与死细胞同时进行双重荧光染色，可用于细胞活性与细胞毒性的检测。用490nm激发时可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞；而用545nm激发时仅可观察到死细胞。

保存条件：

-20℃避光保存，有效期1年。

注意事项：

1. 由于Calcein-AM储存液对湿度非常敏感，请在每次使用后紧紧密封Calcein-AM储存液的盖子。如果不能一次用完，建议根据单次用量分装密封保存，防止
潮湿环境中发生自发性酯水解。例如分装成10μl/管，用封口膜封口，并用铝箔纸包裹，放在一个密闭性能好的塑料袋中，并放入一包干燥剂，在-20℃密封避光保存。

2. 染色前使用无血清培养基（血清中可能含有酯酶）或者 PBS 洗涤细胞，缓冲液中不能含有初级或次级胺，因为脂肪组胺可裂解 AM 酯并妨