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原创 如何给Seurat对象的基因重命名(基因名转换)?

摘要:本文介绍了在单细胞分析中如何修改Seurat对象的基因名称。由于基因ID与基因Symbol形式差异或跨物种分析需求,常需进行基因名转换。原解决方案仅修改RNA assays的counts、data和scale.data部分,容易导致后续分析报错。作者提出了改进版函数RenameGenesSeurat_v2,可对所有assay(包括SCT)和PCA降维数据进行基因名转换,并处理了变量特征和scale.data的匹配问题。该函数支持指定基因子集,适用于常规单细胞(RNA)和空间转录组(Spatial)数据

2025-06-27 16:17:21 1453

原创 Seurat常规聚类和SCTransform脚本汇总

本文介绍了两种基于Seurat包的单细胞分析流程封装函数。常规流程版通过NormalizeData和ScaleData进行数据标准化和聚类分析,适用于中小数据集;SCTransform版采用更先进的归一化方法,适合处理大规模数据。两个函数均可设置线粒体基因过滤、主成分数目、聚类分辨率等参数,简化了单细胞分析的代码结构。作者指出,虽然R语言适合初学者,但对于大数据分析Python更具优势。这些封装函数提高了分析效率,为单细胞研究提供了便捷工具。

2025-06-25 10:16:37 603

原创 Seurat的三种单细胞数据整合方法汇总(批次校正)

摘要:单细胞数据整合是消除批次效应的关键步骤,本文介绍了三种常用方法:1)CCA整合(Seurat自带),适合多数情况但耗时较长;2)SCTransform预处理后整合,理论上更合理但资源消耗大;3)Harmony降维整合,速度快且效果较好。三种方法均提供R代码实现,支持线粒体基因过滤、数据标准化和聚类分析,参数包括主成分数、基因数阈值等。通过比较不同整合策略,研究者可根据数据规模和分析需求选择合适方法。

2025-06-24 17:27:15 2189

原创 结合Seurat批量去双胞(DoubletFinder)

单细胞数据分析预处理中去除双胞至关重要。本文介绍了使用DoubletFinder R包进行双胞去除的流程,重点展示了批量处理的函数封装方法。双胞是实验中多个细胞混合形成的伪细胞,会影响细胞类型鉴定和分析结果。文章详细讲解了函数参数设置、标准去双胞流程、结果处理及批量操作建议,适用于不同样本量的项目。作者强调参数需根据实际数据调整,并提醒DoubletFinder处理时间较长,建议并行处理。最后指出DoubletFinder可能无法完全去除双胞,建议结合聚类结果手动删除可疑亚群。

2025-06-20 15:16:43 1623

原创 结合Seurat批量去除环境RNA污染(SoupX)

摘要: 环境RNA污染是单细胞数据分析中常见问题,可能导致基因在非目标细胞中异常高表达。SoupX工具通过分析未过滤的全矩阵(tod)和过滤后的分析矩阵(toc),自动识别并校正污染基因(如PBMC中的HBB或脑组织中的SLC17A7)。其核心步骤包括聚类辅助污染比例(rho)估算(默认0.2可去除99%污染)及矩阵校正。虽校正后矩阵转为小数可能增加存储负担,但保留原始精度更佳。效果对比显示处理后数据更干净,且对内存和时间需求较低。需注意不同组织污染基因差异,灵活调整参数。

2025-06-19 14:59:40 1508 1

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