【辰辉创聚生物】Human CCR2 Protein:科研用途下的趋化因子受体研究工具

C-C趋化因子受体类型2(CCR2) 是一种关键的G蛋白偶联受体(GPCR),广泛参与炎症、免疫细胞迁移和组织损伤反应。该受体因其在单核细胞募集、免疫调节以及肿瘤免疫中的重要作用而成为免疫学和细胞生物学研究中的高频目标。在基础科研中,recombinant human CCR2 protein(重组人CCR2蛋白) 是研究CCL2/CCR2信号轴不可或缺的试剂,广泛用于蛋白互作验证、细胞迁移实验和药物筛选体系构建。

1. CCR2蛋白概述与结构特性

CCR2是GPCR超家族成员,具有七次跨膜螺旋结构,胞外N端含有糖基化位点,胞内C端则负责信号转导的蛋白相互作用域。人CCR2蛋白由374个氨基酸构成,具有两个主要剪接变体:CCR2A和CCR2B,其中CCR2B是最常见的功能型形式。

CCR2的主要配体是CCL2(又名MCP-1),与其结合可激活G蛋白信号通路,引起细胞内钙离子浓度升高、趋化迁移、细胞黏附分子表达增加等反应。

该受体在多个生理系统中发挥重要作用,包括:

单核细胞向炎症部位的募集

血管内皮细胞与免疫细胞的互作调节

神经免疫和外周免疫系统的相互调节

2. CCR2的生物学功能与免疫相关性

CCR2广泛表达于外周血单核细胞、记忆T细胞、树突状细胞及巨噬细胞亚群中。在多种炎症性疾病模型(如动脉粥样硬化、自身免疫病、感染性疾病)中,CCR2信号通路的激活是免疫细胞浸润和局部免疫级联反应的关键步骤。

此外,CCR2也在肿瘤免疫微环境中扮演双重角色:

促进肿瘤相关巨噬细胞(TAM)向M2型极化

调控肿瘤细胞对免疫清除的逃逸能力

因此,CCR2不仅是 炎症研究试剂(inflammation research reagent) 的核心分子之一,也是研究肿瘤免疫机制和治疗耐受性的常用工具靶标。

3. 重组CCR2蛋白的实验应用

3.1 蛋白-配体相互作用验证

重组CCR2蛋白通常以Fc融合或His标签形式表达,常用于与CCL2等配体的结合实验。ELISA和表面等离子共振(SPR)系统可利用 recombinant chemokine receptor(重组趋化因子受体) 与天然或人工配体建立结合动力学曲线,分析结合亲和力、解离速率等参数。

这些实验可用于验证候选趋化因子或小分子抑制剂是否干扰CCR2-CCL2相互作用。

3.2 单核细胞迁移实验

CCR2是 monocyte migration assay(单核细胞迁移实验) 的关键受体,用于模拟炎症环境中单核细胞的向化学因子迁移现象。实验中,重组CCL2可作为诱导剂,重组CCR2则用于建立标准模型或作为拮抗实验对照。

在Transwell或微流控芯片中评估CCR2信号通路功能,可揭示趋化反应的强度和依赖性。

3.3 肿瘤微环境与免疫细胞分析

利用CCR2蛋白作为检测或拮抗工具,可研究肿瘤组织中TAM的募集机制。例如,在三阴性乳腺癌、小细胞肺癌等模型中,CCR2阳性巨噬细胞的积聚与免疫抑制、血管新生和药物耐受密切相关。

科研中可通过CCR2与其配体间的竞争结合实验或阻断实验,评估潜在免疫调节剂的作用路径。

3.4 高通量筛选中的靶点构建

CCR2作为G蛋白偶联受体,也常用于构建高通量药物筛选平台。其重组蛋白形式被用于验证配体依赖性信号通路活化情况,如β-arrestin募集、cAMP生成或MAPK磷酸化等,适用于CCR2信号调节剂的功能研究。

重组CCR2 Fc融合蛋白在此类平台中可作为标准化试剂,提升实验一致性。

4. 重组人CCR2蛋白的制备特性

常用的 recombinant human CCR2 protein(重组人CCR2蛋白) 多数以哺乳动物细胞(如HEK293)表达,具有较好折叠状态与天然构象保留。该蛋白常融合Fc区域用于免疫沉淀、ELISA检测或细胞粘附实验。

典型制备参数如下:

蛋白来源:HEK293或CHO细胞表达

标签形式:Fc或His标签

分子量:约65–75 kDa(含糖基化修饰)

纯度要求:>95%,SDS-PAGE验证

生物活性:经CCL2结合测试或细胞激活实验验证

此外,为避免实验误差,重组CCR2蛋白的内毒素含量通常控制在<0.1 EU/μg以下,确保其在细胞实验中的安全性和可靠性。

5. 与CCR2蛋白相关的实验组合策略

科研中,为更全面地研究CCR2通路,常搭配以下试剂使用:

重组CCL2蛋白:用于诱导细胞趋化或配体结合验证

CCR2阻断抗体或小分子抑制剂:分析信号通路依赖性

ELISA检测试剂盒:定量分析CCR2或CCL2水平

流式细胞术抗体:用于CCR2表达细胞群体分析

这些工具组合构成了完整的CCL2/CCR2轴研究体系,适用于细胞机制解析、药效评价与疾病模型分析。

结语

CCR2作为连接免疫细胞迁移与组织炎症反应的关键受体,已成为多个科研领域中的重要研究靶点。在实验研究中,human CCR2 protein(人源CCR2蛋白) 的重组形式提供了精确、可控的模型系统,用于信号通路验证、蛋白结合分析以及药物筛选。

未来,随着免疫研究与单细胞技术的发展,CCR2蛋白作为标准试剂的需求将持续增长。其在机制研究、药效验证及新型靶向策略探索中的应用价值也将持续拓展。

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