酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA/ELASA)是一种方便灵敏的抗体和抗原检测方法,目前已经被广泛应用于多个领域。但是,在研究和临床领域,实验过程中出现的假阳性常会被误判为真实的抗体-抗原反应,误导后续研究方向,尤其是在检测低稀释度下的人/动物血清中的自身抗体时,一方面假阳性反应发生的可能性大大增加,另一方面,缓冲液成分所引起的抗环境因子抗体对检测结果的干扰效果也变得尤为显著。
Chondrex ChonBlockTM 系列ELISA Buffer可以解决这一难题,改进ELISA中的抗体检测方法,该试剂可用于封闭(图1)和样本稀释(图2),封闭非特异性结合位点,大大减少了ELISA实验中的背景干扰。Chondrex还可提供ChonBlockTM检测抗体稀释缓冲液(cat#90681),用于进一步减少ELISA中的非特异性反应。如需购买Chondrex公司产品,请联系Chondrex代理商欣博盛生物。

图1 防止假阳性反应
用5% BSA-Tween、NGS和ChonBlock按1:100稀释人血清样本,分别加入未包被抗原、人I型胶原蛋白(HI)和人II型胶原蛋白(HII)包被的孔中。结果表明,BSA不能封闭样本中免疫球蛋白疏水结合位点,因此无论ELISA板涂层如何,在所有孔中观察到的OD值几乎相同。相反,ChonBlock封闭可以防止这种非特异性反应,并能像NGS一样有效区分真实抗体-抗原反应和假阳性反应。

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