Promise Advance Proteomics—蛋白定量

Promise Advance Proteomics 致力于开发基于质谱的蛋白质定量的创新技术，解决生物样品中蛋白质绝对定量的问题。目前PromiseAdvance Proteomics 提供的产品主要是用于液相色谱-质谱定量的稳定同位素标记蛋白和相关质控蛋白以及提供质谱蛋白质定量的服务。

稳定同位素标记(SIL)的蛋白和治疗性单克隆抗体

稳定同位素标记(SIL) 的分析物蛋白质被广泛认为是使用LC-MS绝对定量蛋白质的最佳内标(IS )，SIL蛋白经常被认为是内标的'金标准'。

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使用SIL蛋白作为内标的好处是与目标蛋白分析物具有相同的理化特性。这意味着可以在样品制备工作流程开始时引入内标，并在整个分析过程中与分析物蛋白一起进行处理(见下图)处理流程。在样品提取开始时添加SIL蛋白可以控制由于免疫亲和或其他分离技术、酶消化、其他分析前处理以及LC和质谱电离引起的变化。

上图：稳定同位素标记蛋白作为液相色谱-质谱定量的内标的工作流程

目前Promise Advance Proteomics提供的稳定同位素标记(SIL)的蛋白和治疗性单克隆抗体有如下：

稳定同位素标记(SIL)的蛋白

Human Growth Hormone	Vitamin D Binding Protein
Alpha Synuclein	Troponin I
Tau-441	Neurofilament
Human Serum Albumin	Alpha-fetoprotein
Procalcitonin	Clusterin
KRAS	Cystatin C
Human Erythropoietin	LRRK2 (on demand)
Human Carboxypeptidase B2	Apolipoproteins

稳定同位素标记(SIL)的治疗性单克隆抗体

Infliximab	Adalimumab
Trastuzumab	Bevacuzimab
Etanercept	Ipilimumab“antibody like”
Cetuximab	Nivolumab “antibody like”
Rituximab	Pembrolizumab “antibody like”

EMA指南建议在LC-MS/MS方法中尽可能使用SIL蛋白。除此之外，越来越多的科学文献强烈支持使用全长重组SIL蛋白作为内部标准。值得注意的是，这些文献表明，与其他内标方法(例如SIL肽或SIL延伸肽)相比，在样品制备开始时添加SIL蛋白可以提高定量液相色谱-质谱分析的准确度和精密度。