2022.11.21【bug笔记】|bam文件报错:Cannot add sequence that already exists in SAMSequenceDictionary

项目场景:

sam文件是通过hisat2,bowtie2或者bwa将rawdata进行比对后得到的包含比对信息的数据格式。经过samtools处理后得到的bam文件经常用于后续分析,比如RNA-seq分析时,可以统计序列的插入片段也可以做后续定量,WGS流程里比对后生产的bam文件也可以去冗余获取snp位点。


问题描述

在RNA-seq分析流程中,数据完成比对,并经过samtools转换成bam文件后,准备调用picard进行insert size统计时发生报错。

请添加图片描述
最主要的问题还是这句话。

Cannot add sequence that already exists in SAMSequenceDictionary: 1

原因分析:

根据报错直译,应该是里面跟序列相关的标记(1)重复导致的报错,检查了一下,发现是自己这个项目用的参考基因组是合并的。关键点在于,两个参考基因组的序列名称虽然不同,但是命名都是1开头,基因组建库的时

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