2020.10.13丨Blast本地比对及可视化

  • 这次接到一个客户的需求,他自己组装了一个大肠杆菌的序列(之前客户用它比对,所以简称A基因组),并且想用这个基因组对几个样品进行比对和注释,但注释结果不太好,所以问我们能不能比对用这个客户组装的基因组,注释用NCBI上的标准的参考基因组(B基因组)的注释文件。
  • 我的第一反应就是不行,即使物种类似,不同基因组肯定在长度、位置上有差异,导致注释信息不匹配。本来都打算直接用B基因组给客户从比对开始做。但领导提醒我,开始之前还是需要先回复客户,得到客户的意见反馈后再开始。如何给客户回答这个问题,就是我本次的工作。
  • 首先,在NCBI上检索,在核苷酸一栏检索得到客户组装的A基因组\B基因组的序列信息
  • 查看Genbank基本信息,发现组装序列为4546849 bp,而标准基因组有4641652 bp 。10万bp的差异,基本不能用了。接下来就是要对两个序列进行比对,看看有没有可能缺失片段是连续的,如果正好连续且都在尾部,那前面注释信息似乎也可以用,不过这个概率太小了。
  • 本来打算线上比对,结果软件提示序列过长,不支持,因此,我们需要下载序列到本地进行比对。
  • 首先,下载A、B基因组序列,选择的是fasta格式
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