检测 lincRNA 和 mRNA 是否有序列互补?

1.下载序列

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nucleotide/

(1)搜 LINC00592

大概这个就是:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/NR_027358.2
其他的太长,包含intron

(2)搜 NTN1

右侧选择物种:人,
忽略:PREDICTED:,VIRTUAL,partial

可能是这个: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/NM_004822.3

2.比对

https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi?PROGRAM=blastn&PAGE_TYPE=BlastSearch&LINK_LOC=blasthome

  • 勾选 Align two or more sequences
  • 输入 fasta格式的序列。
  • 建议勾选 Show results in a new window

以下为示例序列,只截取了前两行:

>lncRNA-LINC00592
AGGCAGGTGGAGAGGGGATGGGGGAGGTCTCAGGTCCTCTTGCTCACCCATCAGCTGTGTAGTGTCTGAAG
>gene-NTN1
ACTCCCAGCGCGAGTGGCGGCGGCGGCGGAGCCTTCGGGGGCGAGCGCGCGTGTGTGTG

点 blast 按钮后,新页面提示:No significant similarity found. For reasons why,click here

那就是没有匹配区域了,或者需要调整参数?

(2)修改参数

word size 修改为 16 个: 还是没找到。

(3)阳性测试

从gene复制一段20bp的序列到lncRNA中,发现匹配。
把这一段20bp的反向互补后,还能匹配,只是subject序号反过来了,左边的大。

也就是blast考虑反向互补后,还是没有匹配结果。

那大概率就是没有匹配序列区域了。

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