1.下载序列
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nucleotide/
(1)搜 LINC00592
大概这个就是:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/NR_027358.2
其他的太长,包含intron
(2)搜 NTN1
右侧选择物种:人,
忽略:PREDICTED:,VIRTUAL,partial
可能是这个: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/NM_004822.3
2.比对
https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi?PROGRAM=blastn&PAGE_TYPE=BlastSearch&LINK_LOC=blasthome
- 勾选 Align two or more sequences
- 输入 fasta格式的序列。
- 建议勾选 Show results in a new window
以下为示例序列,只截取了前两行:
>lncRNA-LINC00592
AGGCAGGTGGAGAGGGGATGGGGGAGGTCTCAGGTCCTCTTGCTCACCCATCAGCTGTGTAGTGTCTGAAG
>gene-NTN1
ACTCCCAGCGCGAGTGGCGGCGGCGGCGGAGCCTTCGGGGGCGAGCGCGCGTGTGTGTG
点 blast 按钮后,新页面提示:No significant similarity found. For reasons why,click here
那就是没有匹配区域了,或者需要调整参数?
(2)修改参数
word size 修改为 16 个: 还是没找到。
(3)阳性测试
从gene复制一段20bp的序列到lncRNA中,发现匹配。
把这一段20bp的反向互补后,还能匹配,只是subject序号反过来了,左边的大。
也就是blast考虑反向互补后,还是没有匹配结果。
那大概率就是没有匹配序列区域了。
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