新型细胞模型检测多环芳烃致癌潜力
1. 研究背景
化学致癌物可根据致癌的两阶段模型分为引发剂和促进剂两类。大多数引发剂可通过各种遗传毒性测试检测出来,而对于肿瘤促进剂,虽有多种检测方法被提出,但都未常规用于监管目的。因此,开发一种检测遗传毒性和非遗传毒性致癌物的方法是化学品安全评估的一大挑战。
传统的BALB/c 3T3细胞转化试验可模拟两阶段致癌过程,但因操作繁琐、耗时且灵敏度和有效性不足,未被广泛接受作为常规筛查方法。而新型细胞模型(使用Balb - E6E7细胞的改进细胞转化试验)应运而生,旨在检测多环芳烃(PAHs)的致癌潜力。
2. 材料与方法
2.1 化学品
使用的化学品包括苯并[a]蒽(B[a]A)、芘(Pyr)、苯并[ghi]苝(B[ghi]P)、3 - 甲基胆蒽(MCA)、12 - O - 十四酰佛波醇 - 13 - 乙酸酯(TPA)、二甲基亚砜(DMSO)和ITES(由牛胰腺胰岛素、人转铁蛋白、乙醇胺和亚硒酸钠组成),均购自Sigma Chemical Co.,化学品溶解于DMSO,培养基中DMSO终浓度调整为0.5% v/v。
2.2 细胞培养
Balb/c 3T3克隆A31细胞和Balb - E6E7细胞在添加10%胎牛血清(FBS)、4 mM L - 谷氨酰胺和1%抗生素混合物的DMEM培养基中,于标准培养条件(95%空气/5% CO₂,37°C,湿润环境)下培养。
2.3 利用Balb - E6E7细胞检测PAHs的引发活性
- 引发试验 :将指数生长期的Balb - E
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