细胞生物化学与药物及无机毒素的生物处置
1. 酶动力学相关内容
在酶动力学中,反应速率与底物浓度密切相关。在底物浓度较低时,反应速率几乎与底物浓度 [S] 成正比;而在高底物浓度下,反应速率渐近地接近最大反应速率 vmax,因为此时反应基本与底物浓度无关。
通过实验测量不同底物浓度下的初始反应速率,我们可以绘制出相应的图像。从图像中可知,使初始速度达到 1/2 vmax 的底物水平就是米氏常数 kM 的值。推导过程如下:
由米氏方程(8.6.9),当 v0 = vmax / 2 时,
[
\frac{1}{2}v_{max} = \frac{v_{max}s}{k_M + s}
]
求解 kM 可得:
[
k_M = s
]
因此,kM 可理解为反应速率达到最大反应速率一半时的底物浓度。
对米氏方程(8.6.9)取倒数,得到 Lineweaver - Burk 方程:
[
\frac{1}{v_0} = \frac{k_M + s}{v_{max}s} = \frac{k_M}{v_{max}}\frac{1}{s} + \frac{1}{v_{max}}
]
(8.6.10)
该方程表明,可以对 1/v0 与 1/s 的双倒数图进行最小二乘法拟合,这有助于准确确定 vmax。此图的截距 b 为 1/vmax,斜率 m 为 kM / vmax,由此可确定 vmax 和 kM 的值。
将 Lineweaver - Burk 方程(8.6.10)两边同时乘以 v0vmax,可得到另一个可用于最小二乘法的米氏方程变换形式:
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