8、海洋生物基因研究与癌细胞分泌途径基因网络重建

海洋生物基因研究与癌细胞分泌途径基因网络重建

在生物学研究中，基因的奥秘一直是科学家们探索的重点。本文将围绕海洋生物（海胆和海星）的基因研究以及癌细胞分泌途径的基因网络重建展开，为大家揭示其中的关键技术和重要发现。

海洋生物基因研究实验流程

在对海胆和海星的基因研究中，涉及到多个关键步骤，下面为大家详细介绍。
- 显微注射
- 注射方法 ：海胆的显微注射按照Annunziata和Arnone的方法进行，海星则依据Cheatle Jarvela和Hinman的方法。
- MASO浓度 ：Sp - Lox和Sp - Cdx翻译MASO浓度为150 μM；Pm - Lox翻译MASO和Pm - Cdx剪接MASO浓度为700 μM。
- 注射数量与重复 ：每个实验和每种MASO，海胆注射600个受精卵，海星注射50个受精卵，且每个实验重复三次，使用不同批次胚胎以获得三个独立生物学复制品。同时设置阴性对照，注射100 μM标准对照吗啉代寡核苷酸。
- 胚胎收集、RNA提取与测序
- 胚胎培养 ：注射和未注射的海胆及海星受精卵在15℃过滤海水中发育至所需阶段后收集。
- RNA提取 ：将胚胎收集到管中，3000 rpm离心2 - 3分钟去除海水，使用RNAqueous - Micro Kit提取RNA。
- RNA检测 ：测序前使用Agil