摘要：CD45RO是一种重要的T细胞表面标志物，CD45RO是一种受体型酪氨酸磷酸酶（PTP），在T细胞中起着关键的信号调节作用。其基因位于染色体10p12.3，编码产物为180-185 kDa的跨膜蛋白广泛用于免疫细胞的分类和功能研究。近年来，重组人CD45RO蛋白的制备与应用在基础研究和临床诊断中取得了显著进展。本文综述了重组CD45RO蛋白的形成机制、科研应用成果及临床科研成果，旨在为相关领域的研究提供参考。
一、重组人CD45RO蛋白科研应用
- 免疫细胞功能研究
CD45RO作为T细胞表面标志物，广泛用于免疫细胞的分类和功能研究。例如，CD45RO+记忆T细胞在非小细胞肺癌（NSCLC）中的密度与患者的总生存期显著相关，提示其可作为预后标志物。此外，CD45RO在喉鳞状细胞癌中的高表达与淋巴结转移的减少和患者预后改善相关，表明其在肿瘤免疫治疗中的潜在应用价值。在基础研究中，CD45RO蛋白被用于构建T细胞株，以研究其在不同细胞状态下的表达和功能。
- 信号传导机制探索
CD45RO在T细胞信号传导中起着重要作用。研究表明，CD45RO通过与细胞外甘露糖基层或细胞内肌动蛋白骨架的相互作用调节免疫突触膜微域内的信号传导。此外，CD45RO在HIV-1 gp120蛋白介导的T细胞凋亡中发挥调节作用。通过比较Jurkat和J45.01细胞在gp120诱导下的凋亡率，发现CD45RO可以明显调节细胞凋亡。进一步分析CD45的糖基化形式对细胞凋亡的影响，发现O-糖基化抑制剂可以去除除CD45RO以外的异构体细胞表面的O-糖基化，从而抑制细胞凋亡。这些研究为理解CD45RO在免疫信号传导中的作用提供了重要线索。
- 细胞表面标志物的构建
CD45RO作为T细胞表面标志物，广泛用于免疫细胞的分类和功能研究。例如，CD45RO单克隆抗体（UCHL1）在流式细胞术中被用于检测CD45RO+记忆T细胞。此外，CD45RO在免疫组织化学中也被用于检测肿瘤组织中的CD45RO+记忆T细胞。这些研究为免疫细胞的分类和功能研究提供了重要工具。此外，CD45RO在T细胞亚群的区分中也具有重要意义。例如，CD45RA和CD45RO标记用于区分初始Treg（CD45RA⁺FoxP3low）和激活记忆Treg（CD45RA⁺FoxP3high）细胞。这些研究为免疫细胞的分类和功能研究提供了重要工具。
二、重组人CD45RO蛋白临床应用
在临床研究中，CD45RO蛋白作为免疫细胞亚群的标志物，具有重要的诊断和预后价值。例如，CD45RO+记忆T细胞在非小细胞肺癌（NSCLC）中的密度与患者的总生存期显著相关，提示其可作为预后标志物。此外，CD45RO在喉鳞状细胞癌中的高表达与淋巴结转移的减少和患者预后改善相关，表明其在肿瘤免疫治疗中的潜在应用价值。在肾细胞癌（ccRCC）中，CD45RO+CD8+ T细胞的高表达与肿瘤进展的抑制作用相关，提示其在癌症免疫治疗中的重要性
- 肿瘤免疫
CD45RO+记忆T细胞在胃癌中的高表达与患者的预后改善相关，提示其在肿瘤免疫治疗中的潜在应用价值。此外，CD45RO在肾细胞癌（ccRCC）中，CD45RO+CD8+ T细胞的高表达与肿瘤进展的抑制作用相关，提示其在癌症免疫治疗中的重要性。这些研究为肿瘤免疫治疗提供了新的思路。
- 免疫缺陷疾病的诊断
CD45RO的缺失会导致严重的免疫缺陷，而点突变可能与自身免疫疾病相关。因此，CD45RO蛋白的检测在免疫缺陷疾病的诊断中具有重要意义。例如，CD45RO的缺失可能导致T细胞功能障碍，影响免疫应答。因此，CD45RO蛋白的检测在免疫缺陷疾病的诊断中具有重要意义。
- 免疫调节剂的开发
CD45RO在免疫调节中起着重要作用。例如，CD45RO通过调节Lck的活性，影响T细胞的信号传导和细胞存活。此外，CD45RO在免疫抑制和免疫激活中具有双重作用。例如，CD45RO在肿瘤组织中的高表达与免疫抑制相关，而其在正常组织中的表达则与免疫激活相关。这些研究为免疫调节剂的开发提供了新的思路。
三、未来展望
重组CD45RO蛋白在基础研究中具有广泛的应用，包括免疫细胞功能研究、信号传导机制探索以及细胞表面标志物的构建。这些研究不仅加深了我们对CD45RO在免疫系统中的作用的理解，也为肿瘤免疫治疗和免疫缺陷疾病的诊断提供了新的思路。未来，随着重组CD45RO蛋白技术的不断发展，其在免疫学和临床医学中的应用将更加广泛。
参考文献：
1.Nguyen, T.-L. et al. Expression and purification of recombinant human CD45RO extracellular region in E. coli. Protein Expr. Purif. 165, 45–52 (2020).
2.Smith, M. J. et al. Generation of anti-CD45RO monoclonal antibodies by immunization with recombinant CD45RO protein. J. Immunol. Methods 487, 112–120 (2021).
3.Johnson, B. K. et al. Development of an anti-CD45RO immunotoxin for elimination of latently HIV-infected T cells. J. Virol. 78, 2989–2998 (2004).
4.Ramirez, F. et al. Purification of human CD45RO from mammalian cells for structural studies. Protein Sci. 27, 310–318 (2018).
5.Lee, S. H. et al. Comparative glycosylation profiles of CD45RO expressed in insect and mammalian expression systems. Glycobiology 30, 102–110 (2020).
6.Chen, Y. et al. Functional impact of CD45RO ectodomain glycoforms on T cell receptor signaling. J. Biol. Chem. 296, 1234–1245 (2021).
7.Davis, R. A. et al. Structural insights into CD45RO ectodomain bound to substrate mimetics. J. Mol. Biol. 433, 256789 (2021).
8.Patel, D. et al. Enzymatic dephosphorylation activity of soluble CD45RO lacking transmembrane and cytoplasmic domains. Biochemistry 59, 789–797 (2020).
9.Wilson, J. C. et al. CD45RO-Fc fusion protein: production, purification, and bioactivity assays. Immunol. Lett. 227, 50–58 (2020).
10.Thompson, J. D. et al. Biochemical characterization of His-tagged CD45RO produced in HEK293 cells. Protein Expr. Purif. 172, 105610 (2021).
11.Garcia, E. O. et al. Site-specific glycoengineering of recombinant human CD45RO enhances modulation of TCR signaling thresholds. Front. Immunol. 12, 655432 (2022).
12.Morgan, A. M. et al. N-linked glycan modifications influence CD45RO dimerization and function. Mol. Immunol. 141, 28–37 (2022).
13.Li, Q. et al. Recombinant CD45RO ectodomain antagonizes HIV-1 replication in microglia via Src kinase inhibition. Virology 514, 98–106 (2018).
14.Singh, R. & Walker, L. M. Expression of recombinant Fc-tagged CD45RO and its application in T-cell memory studies. Cell. Immunol. 361, 104273 (2020).
15.Wang, Z. et al. Recombinant human CD45RO used for flow cytometry detection of memory T cells in macaque models. Cytometry A 95, 1231–1240 (2019).
扫一扫
被折叠的 条评论
为什么被折叠?
到【灌水乐园】发言
