39、时空肿瘤克隆动力学研究

时空肿瘤克隆动力学研究

1. 研究背景与目标

在肿瘤研究领域，了解肿瘤克隆的时空动态对于理解肿瘤的生长、发展以及对治疗的反应至关重要。利用LeGO载体可以轻松地对细胞进行荧光标记，基于此，研究人员开发了一种新颖的高通量图像处理框架，用于分析结直肠癌（CRC）细胞的克隆动力学。同时，还构建了一个简单的双函数基于代理的细胞增殖模型，以探索局部密度对集落生长的影响。

2. 材料与方法

2.1 细胞培养

• 细胞种类 ：使用HT55（Sanger Institute）细胞和实验室先前建立的原代人胚胎成纤维细胞（HEFs）。
• 培养基 ：单培养时，细胞在添加1%青霉素 - 链霉素（Gibco）和10%胎牛血清（FCS；Gibco）的DMEM/F12（Life Technologies）中培养；共培养时，培养基中FCS浓度调整为0.1%。
• 培养条件 ：细胞在37°C和5.0% CO₂环境中孵育。

2.2 多色标记

• 载体改造 ：将人类c - Myc原癌基因的核定位信号（3’ GGACGACGCTTCTCCCAGTTTAACCTG 5’）插入LeGO - C2（27339）、LeGO - V2（27340）和LeGO - Cer2（27338）（Addgene）载体中，实现核可视化。
• 转导过程 ：在12孔板的单孔中接种50,000个