解决BLAST Database error: Error pre-fetching sequence data

博客讲述了在使用Uniprot数据库进行BLAST搜索时遇到的错误——Error pre-fetching sequences data。作者按照blast手册创建mask文件和数据库,但在使用blastp命令时遇到问题。通过排除法发现,错误可能出现在创建数据库时使用了非必要参数parse_seqids。移除该参数后,blastp能正常运行并获取比对结果。解决方案是简化创建数据库的命令,不包含parse_seqids选项。

1、背景:

下载Uniprot数据库中的蛋白质序列到本机,使用该文件创建BLAST的搜索数据库,然后使用blastp命令在数据库中搜索。

2、错误

按照blast手册上的指导,为了加快搜索的过程,使用mask文件。从Uniprot下载的序列文件sequences.fasta,内容如:

>sid1

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx

>sid2

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx

.................................................................

1)创建mask文件:

segmasker -in sequences.fasta -infmt fasta -outfmt maskingfo_asnl_bin \

-out refsequences.asnb -parse_seqids

2) 创建数据库

makeblastdb -in sequences.fasta -input_type fasta -dbtype prot -out uniprot \

-title "Uniprot" -parse_seqids

3) 序列比对

blastp -db uniprot -query input.fasta -out output.txt -outfmt 7

结果报错:BLAST Database error: Error pre-fetching sequences data

3、解决方法

在创建mask文件和创建数据库时不使用parse_seqids。

segmasker -in sequences.fasta -infmt fasta -o

在使用 `blastdb_aliastool` 时,出现 **BLAST Database error: Database memory map file error** 错误通常与数据库索引文件的完整性、路径配置或权限设置有关。以下是一些可能的解决方案: ### 1. 检查数据库路径与索引完整性 确保数据库文件(如 `.nhr`, `.nin`, `.nsq` 对于核酸数据库)存在于指定路径中,并且没有损坏。如果数据库文件不完整或未正确生成,`blastdb_aliastool` 将无法读取内存映射文件。 ```bash ls /path/to/blastdb/*.nhr /path/to/blastdb/*.nin /path/to/blastdb/*.nsq ``` 如果文件缺失,需重新构建数据库: ```bash makeblastdb -in input.fasta -dbtype nucl -out mydb ``` ### 2. 使用 `-dbtype` 参数明确指定数据库类型 在运行 `blastdb_aliastool` 时,应明确指定数据库类型(核酸或蛋白),避免类型识别错误导致内存映射失败: ```bash blastdb_aliastool -db mydb -dbtype nucl -out new_alias ``` ### 3. 检查文件权限 确保运行 `blastdb_aliastool` 的用户具有对数据库文件及其目录的读写权限。可使用以下命令修改权限: ```bash chmod 644 /path/to/blastdb/*.nhr /path/to/blastdb/*.nin /path/to/blastdb/*.nsq ``` ### 4. 清理缓存并重新生成索引 有时旧的缓存文件可能导致冲突。删除现有数据库索引文件并重新生成: ```bash rm /path/to/blastdb/*.nhr /path/to/blastdb/*.nin /path/to/blastdb/*.nsq makeblastdb -in input.fasta -dbtype nucl -out mydb ``` ### 5. 使用 `-logfile` 参数记录详细错误信息 启用日志记录有助于定位问题根源: ```bash blastdb_aliastool -db mydb -dbtype nucl -out new_alias -logfile blastdb_alias.log ``` 查看日志文件中具体的错误描述,针对性修复。 ### 6. 确保 BLAST+ 版本兼容性 不同版本的 BLAST+ 在数据库格式和工具支持方面可能存在差异。确保使用的 `blastdb_aliastool` 与 `makeblastdb` 版本一致: ```bash blastdb_aliastool -version makeblastdb -version ``` 若版本不一致,建议统一升级或降级至相同版本。 ### 7. 使用绝对路径 在配置数据库路径时,推荐使用绝对路径而非相对路径,避免路径解析错误: ```bash blastdb_aliastool -db /home/blast/nuclblastdb/mydb -dbtype nucl -out /home/blast/nuclblastdb/new_alias ``` ###
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