纸基分子诊断技术:原理、应用与创新
1. 核酸检测技术概述
核酸检测(NAT)通常包括样本采集、提取、扩增和检测等过程。目前,针对NAT的每个步骤都有成熟的专业技术。
- 样本采集与提取 :硅胶柱是最广泛用于核酸分离的平台。
- 核酸扩增与检测 :聚合酶链反应(PCR)是金标准方法。PCR通过控制反应温度,分三步进行:目标双链DNA变性、退火和引物延伸。基于PCR的核酸检测具有高灵敏度和选择性,但需要大型专业设备。为解决这一问题,出现了多种等温扩增技术,可在恒定温度下进行核酸扩增。
| 技术 | 目标 | 反应时间 | 反应温度 | 所需引物 | 灵敏度(拷贝数) | 效率(倍数) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| PCR | DNA或RNA | 2 - 3小时 | 循环(95、50 - 70、72 °C) | 2 | 10² | 10⁸ |
| LAMP | DNA或RNA | < 1小时 | 60 - 65 °C | 4 - 6 |
纸基分子诊断技术解析
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