11、COVID-19 RT-PCR检测全解析：从流程到准确性评估

COVID-19 RT-PCR检测全解析：从流程到准确性评估

1. RT-PCR检测的临床实施流程

在临床环境中，RT - PCR检测有不同的实施流程。不同的研究团队提出了不同的检测流程方案。

1.1 Corman等人的三步检测流程

• 一线筛查 ：通过靶向E基因的不同区域来检测所有与SARS相关的病毒，以尽可能多地识别出感染患者。
• 确认检测 ：若一线筛查结果为阳性，则使用两种不同的引物和两种不同的探针来检测RdRP基因。
• 鉴别检测 ：若确认检测结果也为阳性，则使用两种探针序列中的一种进行鉴别检测。

1.2 Chu等人的检测流程

• 样本筛查 ：使用N基因的引物对样本进行筛查。
• 确认检测 ：使用ORFlb基因的引物进行确认。若患者样本N基因引物检测呈阳性，而ORFlb基因检测呈阴性，则诊断结果不确定，此时需要进行蛋白质检测（即抗体检测）或测序来确认诊断。

2. 检测设备与原理

COVID - 19 RT - PCR检测是一种rRT - PCR检测，可采用单重检测（三个独立的检测）或多重检测（将多个检测组合到一个反应和扩增体系中）的方式。

2.1 单重检测

使用三组引物和探针来检测SARS - CoV - 2核衣壳（N）基因的三个区域，以及一组