FastQC 完整使用指南:高通量测序数据质量控制
FastQC 是一款专业的质量控制分析工具,专门用于处理高通量测序数据。它能够对FastQ或BAM格式的原始序列文件运行一系列分析,并生成汇总结果的报告。
项目概述
FastQC 旨在发现高通量测序数据集中的潜在问题。该程序会突出显示测序文库中任何看起来异常的区域,提醒用户需要更仔细地检查这些部分。该工具不依赖于任何特定的测序技术类型,可用于查看来自大量不同实验类型的文库(基因组测序、ChIP-Seq、RNA-Seq、BS-Seq等)。
安装指南
系统要求
FastQC 是一个跨平台的Java应用程序,理论上可以在任何具有合适Java运行时环境的平台上运行。已测试的平台包括Windows、MacOSX和Linux,使用Oracle v1.6到1.8 JRE。
安装步骤
获取项目源码:
git clone https://gitcode.com/gh_mirrors/fa/FastQC
环境检查: 在运行FastQC之前,请确保系统中已安装合适的Java运行时环境。可以通过以下命令检查Java是否已安装:
java -version
Linux系统安装Java:
- Ubuntu / Mint:
sudo apt install default-jre - CentOS / Redhat: `sudo yum install java-1.8.0-openjdk
运行方式
交互式图形界面运行
Windows系统: 双击运行 run_fastqc.bat 文件。如果需要创建漂亮的快捷方式,可以使用顶层目录中的图标文件。
Linux系统: 使用包含的包装脚本启动程序:
chmod 755 fastqc
./fastqc
或者创建符号链接以便从任何位置运行程序:
sudo ln -s /path/to/FastQC/fastqc /usr/local/bin/fastqc
非交互式管道运行
要将FastQC作为分析管道的一部分运行,可以在命令行中指定要处理的文件列表:
fastqc somefile.txt someotherfile.txt
可以在单次运行中指定任意多个要处理的文件。如果不指定任何要处理的文件,程序将尝试打开交互式应用程序。
核心功能模块
FastQC 提供了一系列分析模块,每个模块都针对测序数据的不同方面进行评估:
    
配置选项
输出目录设置
如果希望将报告保存在包含原始FastQ文件的文件夹以外的其他文件夹中,可以通过设置 --outdir 值来指定替代位置:
--outdir=/some/other/dir/
标准输入处理
如果希望通过数据流从标准输入运行fastqc,可以将'stdin'指定为要处理的文件名:
zcat *fastq.gz | fastqc stdin
要为流式分析结果指定不同于stdin的文件名,可以添加冒号并放入所需的文件名:
zcat *fastq.gz | fastqc stdin:my_results
自定义报告输出
在Templates目录中可以找到名为 header_template.html 的文件,通过编辑此文件可以更改报告的外观。此文件包含报告文件的所有标题,包括CSS部分,可以根据需要进行修改。
文本标签 @@FILENAME@@ 和 @@DATE@@ 是占位符,在创建报告时会填充这些占位符。
配置文件说明
Configuration目录包含以下重要配置文件:
- adapter_list.txt:适配器序列列表
- contaminant_list.txt:污染物序列列表
- limits.txt:质量控制阈值设置
这些配置文件允许用户自定义FastQC的分析参数,以适应特定的实验需求和数据特征。
通过本指南,您可以全面了解FastQC的安装和使用方法,有效进行高通量测序数据的质量控制分析。
创作声明:本文部分内容由AI辅助生成(AIGC),仅供参考



