跨物种识别人类和小鼠基因可变剪接模式的研究
1. 跨物种识别可变剪接模式的策略
采用双向策略并行识别人类和小鼠基因的可变剪接模式,具体步骤如下:
1. 同物种分析阶段
- 从LocusLink数据库获取每个基因的RefSeq序列、对应基因组区域序列和UniGene簇。
- 使用sim4将UniGene簇中的转录本(包括EST和Genbank mRNA序列)与基因组序列进行比对。
- 通过TAP处理基因组比对结果,并聚类成共识剪接模式,与参考基因结构互斥的模式被识别为可变剪接模式。
2. 跨物种分析阶段
- 使用est2genome将一个物种的共识序列与直系同源基因组模板进行比对。
- 进行TAP分析,从“跨物种”转录本比对数据中识别可变剪接模式。此步骤与同物种分析的TAP处理类似,但将筛选低质量比对的同一性百分比要求从92%降至70%。
下面是该策略的流程图:
graph LR
classDef process fill:#E5F6FF,stroke:#73A6FF,stroke-width:2px;
A(同物种分析阶段):::process --> B(获取基因数据):::process
B --> C(转录本与基因组比对):::process
C --> D(生成共识剪接模式):::process
D --> E(识别可变剪接模式):::process
A --> F(跨物种分析阶段):::
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