光学投影断层成像与胰腺癌生物标志物研究
光学投影断层成像在颗粒计数和形态分析中的应用
光学投影断层成像(OPT)是发育生物学中一种强大的成像技术,与X射线计算机断层扫描(CT)类似,它通过记录穿过样品的光线投影图,来重建样品的内部结构。不同的是,OPT使用的是光而非X射线,这在很多情况下对样品的影响几乎可以忽略不计。OPT还能在荧光模式下工作,对激发的荧光标记物的发射光进行成像。
OPT的工作模式
- 明场透射模式 :使用LED光源发出的白光穿过样品,并用相机捕捉图像。样品会被旋转,通常从300到400个不同的视角拍摄投影图像。
- 荧光发射模式 :激发样品内的荧光分子,对发射的光进行成像。
传统上,OPT主要使用与X射线CT相同的重建方法,即逆Radon变换及其实际实现——滤波反投影(FBP)。然而,OPT的光学系统在离成像物镜一定距离处聚焦,离焦平面越远的细节会产生模糊,而FBP方法并未考虑这种光学模糊。
为了提高断层重建的质量,研究人员在透射明场和荧光发射模式的重建过程中引入了光束模型。在明场情况下,使用了高斯光模型及其改进的拉伸高斯光模型(SGBM);在荧光模式下,采用了基于加权Radon变换(WRT)的X射线荧光断层成像重建方法。
实验设置
实验使用了两个样品,分别包含7 µm和15 µm的珠子。样品制备时,将珠子原液按5% v/v的比例混合在2%的琼脂糖凝胶中,并放入内径为1 mm的氟化乙烯丙烯管中。使用自制的OPT系统在明场和荧光模式下对样品进行成像。
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