10、组织工程支架的修饰与碳水化合物改性研究

组织工程支架的修饰与碳水化合物改性研究

1. hSAFs的表征与性质

在研究hSAFs时，对其流变性质的测量是先在流变仪板和锥体之间原位形成水凝胶，然后进行测量。hSAFs的弹性模量（G′）和粘性模量（G′′）随频率变化很小，在最低频率下的测量最具相关性，因为这最接近静止状态（“频率 = 0”）。当温度从20°C加热到37°C时，刚度降低了一个数量级，这可能反映了圆二色光谱（CD）观察到的螺旋度降低，但仍在神经细胞类型的合适范围内。在45°C以上，CD光谱中观察到向β - 结构的转变。

2. hSAFs的功能基序修饰

为了增强hSAFs在组织工程中的适用性，研究人员开发了一种可修饰的变体。通过将叠氮官能团引入hSAF肽中，利用铜催化的叠氮 - 炔环加成反应（CuAAC），可以用炔基官能化的基序对其进行修饰。
- 叠氮官能化的实现 ：将hSAF - p1的N端Lys残基替换为Anl残基，得到hSAF - p1 - K1Z。这是因为Anl和Lys结构相似，且该位置的选择是出于合成实用性考虑。C端Ala残基也可以成功替换为Anl。
- 水凝胶的形成与修饰过程 ：
- hSAF - p1 - K1Z可替代hSAF - p1与hSAF - p2形成水凝胶，得到叠氮官能化的水凝胶。
- 随后通过CuAAC反应，用感兴趣的炔基官能化修饰剂和Cu离子溶液进行处理。反应条件如下：
- 步骤（i）：在pH 7.4的水性MOPS缓冲液中，5°C下反应30分钟，然后室温过夜。
- 步骤（ii）：加入2当量的修饰剂、4当量的CuSO₄、4当量的抗坏血酸钠，室温过夜。