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转载 TCGA各种肿瘤数据的20多种不同玩法/挖掘方法

肿瘤基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)计划是由美国国家癌症研究院(National Cancer Institute,NCI)和美国国家人类基因组研究所(National Human Genome Research Institute,NHGRI)于2006年联合启动的项目,目前共计研究33种癌症类型。TCGA利用大规模测序为主...

2019-09-21 20:23:00 7241

转载 基于基因组测序数据鉴定单碱基变异的方法总结

单核苷酸多态性,英文single nucleotide polymorphism,缩写为SNP,读音为Snip。SNP主要是指在基因组水平上引起的单个碱基的变异,其在群体中的发生频率不小于1%,包括单碱基的转换、颠换以及单碱基的插入和缺失等。多态性示意图(图片来源:genome news network)突变(mutation)和多态性(polymorp...

2019-09-21 10:10:00 1734

转载 单细胞转录组测序技术及各类数据分析方法总结

自从2009年单细胞转录组测序(single-cell RNA-seq,scRNA-seq)技术首次问世,至今已经有几十种不同的scRNA-seq技术相继被开发出来。在过去的十年里,单细胞转录组测序技术得到了蓬勃的发展,从而使得可在单细胞水平揭示全基因组范围内所有基因的表达情况,可以更精准的开展细胞间的表达异质性研究、鉴定新的细胞亚型、解析早期胚胎的发育等。单细胞测序流程(图片来...

2019-09-17 12:35:00 4282

转载 基因组测序、外显子测序和靶向测序有什么样的区别,如何选择?

自从第一代测序技术Sanger测序发明以来,使得人们可以不断在单碱基水平研究各物种的基因组序列。由于Sanger测序价格昂贵,测序通量低等劣势,2005年左右二代测序相继被开发出来,极大地降低了测序的价格和提升了测序的通量。现在测一个人的基因组序列,只需不到1000美元。测序可以在很多不同的层面开展,包括基因组层面、转录组层面、甲基化层面、免疫共沉淀测序等。今天我们重点讨...

2019-09-15 18:30:00 3941

转载 m6A甲基化及预测方法工具总结

DNA、RNA和蛋白三个层面的可逆修饰示意图(Fu et al. Nature Reviews Genetics, 2014)DNA和蛋白存在各种修饰,RNA也不例外,目前已知的RNA修饰已经超过上百种。RNA根据编码性可分为编码RNA(protein-coding RNA)和非编码RNA(noncoding RNA)两大类,这些RNA转录后会发生各种修饰,包括N6-腺苷酸甲基化(N...

2019-09-14 09:18:00 11803

转载 单细胞转录组测序数据的可变剪接(alternative splicing)分析方法总结

可变剪接(alternative splicing),在真核生物中是一种非常基本的生物学事件。即基因转录后,先产生初始RNA或称作RNA前体,然后再通过可变剪接方式,选择性的把不同的外显子进行重连,从而产生不同的剪接异构体(isoform)。这种方式,使得一个基因可产生多个不同的转录本,这些转录本分别在细胞/个体分化发育的不同阶段,在不同的组织中有各自特异的表达和功能,从而极大地丰富...

2019-09-10 12:37:00 3446

转载 基于单细胞测序数据构建细胞状态转换轨迹(cell trajectory)方法总结

细胞状态转换轨迹构建示意图(Trapnell et al. Nature Biotechnology, 2014)在各种生物系统中,细胞都会展现出一系列的不同状态(如基因表达的动态变化等),这些状态(state)之间会按照一定的时间顺序转换。最典型的比如细胞的分化过程,从不成熟的细胞逐渐分化为成熟细胞。此外,细胞在受到外界刺激或扰动时,细胞内基因的表达也可能发生一系列的变化,从而呈现...

2019-09-08 17:36:00 2283

转载 单细胞转录组测序技术(scRNA-seq)及细胞分离技术分类汇总

单细胞测序流程(http://learn.gencore.bio.nyu.edu)在过去的十多年里,高通量测序技术被广泛应用于生物和医学的各种领域,极大促进了相关的研究和应用。其中转录组测序(RNA-seq)被广泛应用于测定和描绘各类物种的基因或转录本的表达情况。但传统的转录组测序技术(bulk RNA-seq)是基于群体细胞,每个样本包含成千上万个细胞,所以最终反映...

2019-09-07 15:23:00 5666

转载 单细胞测序数据的降维方法及细胞亚型的鉴定聚类方法总结

图1、细胞亚型的鉴定及分析(Stegle et al.NATURE REVIEWS | GENETICS, 2015)随着单细胞测序技术的发展,每个研究或实验中测定的细胞数量在显著增加。现在很多单细胞研究中,少则产生几百,多则产生几十万的细胞数量,甚至更多。其中,细胞亚型(cell subtype or cell subpopulations)的鉴定是单细胞测序技术...

2019-09-07 14:46:00 3758

转载 单细胞测序数据的差异表达分析方法总结

无论是传统的多细胞转录组测序(bulk RNA-seq)还是单细胞转录组测序(scRNA-seq),差异表达分析(differential expression analysis)是比较两组不同样本基因表达异同的基本方法,可获得一组样本相对于另一组样本表达显著上调(up-regulated)和下调的基因(down-regulated),从而可进一步研究这些差异表达基因的功能,包括富集的通...

2019-09-07 14:42:00 7489

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