39、背角光遗传学实验全解析

背角光遗传学实验全解析

在神经科学研究中，背角光遗传学实验对于深入理解神经系统的连接和功能至关重要。本文将详细介绍背角光遗传学实验所需的材料、设备、溶液，以及具体的实验方法。

1. 实验材料

1.1 实验动物

在诱导目标神经元表达视蛋白时，需要考虑具体策略。以通道视紫红质 - 2（ChR2）为例，当前技术有多种选择，具体方法受实验目标影响。
- 转基因小鼠 ：可通过商业供应商（如美国缅因州巴尔港的杰克逊实验室）或实验室获取，ChR2能在特定细胞类型中稳定表达。相关文献可能已对目标群体中ChR2表达的保真度和可靠性进行评估。此外，还有可诱导的转基因动物，通过施用四环素或他莫昔芬等因子驱动基因表达，能控制基因表达时间，避免在发育过程中仅短暂表达目标蛋白的神经元群体中表达ChR2。
- Cre表达转基因小鼠 ：可用于将ChR2表达定向到特定群体，可通过与含loxP位点（cre依赖）的ChR2小鼠杂交，或向感兴趣区域注射cre依赖的编码ChR2的病毒来实现。
- 病毒策略 ：在野生型小鼠中也可采用纯病毒策略，商业库中储备了大量病毒工具。使用病毒方法时，需考虑病毒类型（如腺相关病毒和慢病毒）、血清型、启动子，以及是否需要泛神经元或选择性表达。

不同方法的应用、优缺点总结如下表：
| 给药途径 | 表达位置 | 优点 | 缺点 |
| — | — | — | — |
| 转基因育种（如cre/lox） | cre在整个发育过程中在中枢或外周神经系统表达的部位 | - 有许多商业可用的动物品系