38、光遗传学在皮肤 - 神经通讯及脊髓背角回路映射研究中的应用

光遗传学在皮肤 - 神经通讯及脊髓背角回路映射研究中的应用

小鼠位置偏好行为测试

在进行小鼠相关实验时，位置偏好行为测试是一项重要内容。首先，小鼠需要在测试前至少 1 天适应测试箱 15 分钟。测试当天，将单只小鼠放入测试箱，在弱光环境且 LED 阵列关闭的条件下让其自由活动 15 分钟。之后，把小鼠放置在测试箱中心（一个 2 英寸无 LED 灯的空间，即“家室”）。可以使用 5 英寸×10 英寸的有机玻璃隔板限制小鼠在不同腔室间的移动。开启一个或两个 LED 阵列（发出蓝光或黄光），让小鼠在两侧自由活动长达 15 分钟。在此期间，使用面向测试箱的摄像机记录小鼠的移动情况，确保能看到测试箱的每一侧。测试结束后，可手动或使用软件分析小鼠的移动情况，量化其在每个腔室中 15 分钟内所花费的时间。计算每一侧的总停留时间（以 5 分钟为区间），并使用分析软件（如 Prism）进行比较。

例如，在 Krt14 - ChR2 小鼠的位置偏好实验中，11 只 Krt14 - ChR2 小鼠在含蓝光的腔室中停留时间较少，而 7 只野生型小鼠（Krt14 - Cre 小鼠）在蓝光或黄光腔室中停留时间相同。数据通过单因素方差分析和 Tukey 事后检验进行分析，当 p < 0.05 时表示具有显著性差异。

下面是该实验的操作步骤总结：
1. 测试前至少 1 天，让小鼠适应测试箱 15 分钟。
2. 测试当天，将小鼠放入测试箱，弱光且 LED 阵列关闭，自由活动 15 分钟。
3. 将小鼠置于测试箱中心“家室”。
4. 开启 LED 阵列，让小鼠自由活动 15 分钟，同时用摄像机记录。
5. 测试结束后，手动或用软件分析移动情况，量化时间。