啮齿动物脊髓体内光学成像:挑战与解决方案
1. 运动伪影问题及解决办法
体内光学成像技术面临的一个主要问题是活体样本固有的运动。对于脊髓成像而言,有效稳定样本尤其困难。这不仅要应对血管搏动带来的心跳伪影,而且由于脊髓靠近肺部,呼吸伪影也更难处理。此外,脊髓相对松散地位于脊柱内,稳定脊柱并不等同于稳定脊髓本身,运动问题仍然显著。
以下是一些克服运动伪影的方法:
- 物理稳定 :在暴露的脊髓上添加琼脂或硅酮弹性体和盖玻片;将啮齿动物的胸部和腹部悬离载物台,使呼吸运动向下传递。
- 手术方式优化 :通过椎间孔直接观察脊髓背侧,避免椎板切除术,减少运动伪影。
- 呼吸控制 :对啮齿动物进行气管切开术,它们可以自主呼吸以减少头部运动,或者进行人工通气,使图像采集与呼吸频率同步,或在采集期间暂时停止呼吸。
- 动物选择 :小鼠比大鼠更容易稳定,6 - 8周大的小鼠是最佳选择。不过,大鼠更容易稳定麻醉,长时间成像时,小鼠可能会出现喘息,可通过定期清理气道黏液来减少这种情况。
下面是一个mermaid流程图展示解决运动伪影的步骤:
graph LR
A[开始] --> B[选择合适的啮齿动物]
B --> C{是否需要更高稳定性}
C -- 是 --> D[选择小鼠]
C -- 否 --> E[选择大鼠]
D --> F[采取物理稳定措施]
E -
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