28、自由行为动物大脑疼痛成像实验操作全解析

自由行为动物大脑疼痛成像实验操作全解析

在神经科学研究中，了解自由行为动物大脑对疼痛的反应至关重要。本文将详细介绍相关实验的行为装置搭建、神经活动记录以及刺激实验等方面的操作步骤和要点。

行为装置搭建

为了便于实验者接触动物爪子，同时记录神经和行为活动以辅助下游分析，我们设计了一套行为装置。以下是具体的搭建步骤：
1. 选择金属穿孔板 ：在T型槽装置顶部放置钢或铝穿孔板，推荐使用铝质的，因为它不会生锈，更易清洁。注意不要使用鸡笼网或类似的带孔金属板，因为它们可能会在某些实验条件下对动物造成疼痛。如果有电子设备或其他不想被动物粪便污染的物品，可以在底部行为相机下方制作第二层金属板，并放置吸水纸，这一层也可用于放置冯·弗雷细丝等刺激物。
2. 制作塑料容器 ：制作供动物实验时使用的塑料容器，容器可以是全透明红色，或者除正面外其余面为白色，正面尽量为红色，以减少动物看到实验者的机会，同时便于记录动物行为。在容器左侧钻一个小孔，用于放置蔗糖舔嘴。
3. 使用平衡系统 ：由于微型显微镜在长时间实验中会给动物带来不必要的负担，建议使用平衡系统来减轻动物的负担。将平衡臂（SMCLA，Instech labs）通过Thorlabs支柱连接到T型槽系统上，并将其置于动物和容器上方。在开始实验前，将微型显微镜穿过平衡臂，测试平衡臂的重量或弹簧设置，确保其既能让微型显微镜有一定的活动空间，又能保持悬浮状态。
4. 安装摄像头 ：使用两个摄像头记录小鼠行为，一个置于小鼠下方，用于捕捉刺激传递和反射反应；另一个面向测试腔室，用于捕捉小鼠